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登革3型病毒prME和NS1多基因重组质粒DNA免疫原性增强效果观察

发布时间:2023-03-04 15:35
  登革热是由登革病毒引起的蚊媒病毒病,每年全世界登革热患者达一亿。目前对于该病尚缺乏安全有效的疫苗。登革病毒是单股正链RNA病毒,基因组全长约11Kb,含有单一开放读码框架。登革病毒膜蛋白前体prM和包膜蛋白E及非结构蛋白NS1均含有多种抗原表位,因此这些特异的病毒蛋白为登革新型疫苗的主要靶标。 DNA疫苗可以刺激动物产生体液免疫和细胞免疫。但是通常DNA疫苗的免疫原性较弱。将多种DNA疫苗混合后共同免疫将提供针对多种抗原表位的免疫应答,并有可能提高疫苗的免疫原性。本研究采用RT-PCR法获得了登革3型病毒的prME和NS1基因片段,分别将其插入真核表达载体pcDNA6/V5·His-B,C,构建了两个真核表达重组质粒。将构建的重组质粒DNA分别转染真核细胞后用免疫荧光法可检测到外源蛋白的表达。然后将两种重组质粒DNA以混合及单独形式分别免疫BALB/C小鼠,免疫的小鼠可产生中和抗体和特异性CTL。在末次免疫后第33天,双质粒重组DNA组与prME重组质粒DNA组的中和抗体水平均可达到1:32。在术次免疫后第41天,当效靶比为40:1时,双质粒重组DNA免疫...

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
前言
第一部分 我国登革3型病毒prME和NS1基因重组质粒DNA的构建与表达
    一、 登革3型病毒prME基因重组质粒DNA的构建与表达
    二、 登革3型病毒NS1基因重组质粒DNA的构建与表达
第二部分 登革3型病毒prME和NS1多基因重组质粒DNA免疫原性增强效果的观察
第三部分 登革3型病毒prME和NS1多基因重组质粒DNA免疫保护效果的初步观察
结论
参考文献
附录
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致谢



本文编号:3754542

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