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白血病细胞系来源的树突状细胞的诱导、鉴定及冻存方法的研究

发布时间:2023-04-17 04:34
  目的 诱导K562细胞系向树突状细胞转化,寻找一种快速、简便、高效的获取DC方法。 方法 1.分组 取对数生长期的K562细胞,以5×105/ml的浓度接种至24孔板中,并于实验组中分别加入①A23187使终浓度为250ng/ml ②A23187 180ng/ml和rhGM-CSF500U/ml ③rhGM-CSF1000U/ml、rhIL-4500U/ml及rhTNF-α 200U/ml,37℃饱和湿度,5%CO2培养箱中培养7天左右,隔天半量换液并给实验孔补加半量诱导因子。2.形态学观察 通过倒置显微镜观察诱导细胞形态学的动态变化并摄像。3.DC表型鉴定 运用流式细胞术检测诱导K562-DC表面分子CD1a、HLA-DR、CD54、CD83、CD80及CD86表达率,以了解诱导前后及不同方法诱导K562表面分子的差异。4.功能检测MTT法检测DC对异基因淋巴细胞的刺激增殖能力及其致敏T细胞对靶细胞的杀伤作用。 结果 上述三种因子组合均能诱导K562细胞系向成熟DC转化,且含A23187的两组72小时获得DC样细胞的数量明显多于不含A23187的...

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
第一章 A23187快速诱导K562细胞分化成树突状细胞的研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二章 白血病细胞来源树突状细胞低温冻存方法的研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
    综述
    参考文献
致谢



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