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顺序性应用生长因子对软骨细胞的作用

发布时间:2023-04-23 06:30
  前言 组织工程构建关节软骨已经成为关节骨科研究的热点,然而软骨组织工程过程尚需进一步完善。本实验采用体外培养人关节软骨细胞,然后以bFGF及IGF-1对其处理,研究他们对人关节软骨细胞的作用以及明确二者之间的相互作用关系。 材料与方法 1.软骨细胞的原代培养 取材:本实验所用软骨均取自中国医科大学附属第一医院骨科手术的正常成人关节软骨。无菌条件下获取关节表面的关节软骨,PBS缓冲液冲洗干净后放入盛有DMEM培养基的培养皿中,用眼科剪刀及锐刀将软骨切成1mm3的碎块。 原代培养:碎软骨块中加入0.25%胰蛋白酶,37℃消化20min,再以DMEM液终止消化。加入0.02%Ⅱ型胶原酶消化后,以200目不锈钢筛网过滤。将过滤后的细胞悬液以1500rpm离心5min,去上清,加入DMEM培养基重悬,重复3次。细胞计数并检查细胞活力,按105个细胞/ml密度接种到培养瓶,37℃混合气体(体积分数分别为5%CO2和95%O2)及饱和湿度条件下培养,细胞贴壁后每隔3~4d更...

【文章页数】:39 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文缩略语
四、 论文主体
    1 前言
    2 实验材料与方法
    3 实验结果
    4 论文图片
    5 讨论
    6 结论
五、 本研究新见解
六、 参考文献
七、 致谢
八、 综述
九、 个人简介
十、 在学期间发表论文、获奖等题目



本文编号:3799286

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