原头蚴体外形成棘球蚴的优化培养体系研究

发布时间：2023-11-05 08:43

　　目的建立适合细粒棘球绦虫原头蚴在体外形成棘球蚴的培养体系。方法以RPMI1640或DMEM培养基为基质,胎牛血清或绵羊血清为营养成分,人肝细胞株L02为饲养细胞设计配伍2大类、6个组培养体系;培养细粒棘球绦虫原头蚴45 d,根据各组原头蚴的头节外翻率、成囊率和囊泡大小情况,寻找适合原头蚴形成棘球蚴的体外培养体系最佳配伍;在最佳配伍的培养体系继续培养棘球蚴囊泡至180 d。结果在起初的45 d期间,DMEM体系的E组(DMEM+胎牛血清+人肝细胞株L02)培养的棘球蚴生长最快,20 d起原头蚴成囊率高于其他各组(P<0.05),25 d起棘球蚴囊泡大于其他各组(P<0.05),45 d时原头蚴成囊率达到100%;在其后的46～180 d内,棘球蚴囊泡持续增大,至80 d时肉眼可见透明囊泡,至180 d时最大囊泡直径达2.2 mm。结论添加胎牛血清及人肝细胞株L02的DMEM培养基有利于体外培养的原头蚴发育为棘球蚴囊泡。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验材料及仪器
        1.1.2 主要试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞系及培养条件
            1.2.1.1 正常人肝细胞株L02的复苏
            1.2.1.2 正常人肝细胞株L02的传代
        1.2.2 配置不同体系的培养基
        1.2.3 原头蚴的收集与处理
        1.2.4 原头蚴的单相培养
        1.2.5 观察原头蚴状况
        1.2.6 观察在优化的培养体系中棘球蚴成囊状况
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 不同培养体系中各时间点原头蚴形态学观察
        2.1.1 培养45d的原头蚴形态学观察
        2.1.2 45～180 d的原头蚴形态变化
    2.2 各培养组的原头蚴成囊率
    2.3 各培养组的棘球蚴囊泡大小比较
    2.4 各培养组的原头蚴头节外翻率
    2.5 DMEM+胎牛血清+肝细胞株L02组原头蚴囊大小生长曲线
3 讨论



本文编号：3860693