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聚合酶链反应—单链构象多态性技术鉴别结核分支杆菌利福平耐药基因

发布时间:2023-11-08 17:53
  近年来受到人口流动性增大、人口老龄化、过分依赖卡介苗、人类免疫缺陷病毒(HIV)与结核分枝杆菌共感染、毒品及女性吸烟等诸多因素的影响,结核病死灰复燃,全球呈大回升之势。估计全球已有5000万人受耐药结核分枝杆菌的感染。我国是疫情和耐多药率高的国家,2000年全国流行病学调查(流调)显示初始耐药率为18.6%,初始耐多药(MDR,同时耐HK)率为7.6%。结核分枝杆菌耐药性的产生和传播更加剧了结核病的流行。利福平(RFP)作为抗结核一线药物,结核分枝杆菌对其耐药发生率高达90%以上,其耐药性产生是由于其作用靶分子RNA多聚酶的β亚单位的编码基因rpoB突变所致。这类突变属于单碱基错义突变,主要发生在核糖核酸多聚酶的β亚基(rpoB基因),而且突变集中在约81个碱基长度的DNA区段内,故通过PCR-SSCP技术可将97%以上的利福平耐药株快速鉴别出来。PCR-SSCP技术对利福平耐药性的检测具有快速、操作简便、易行的特点,并使应用传统耐药测定方法耗时1~2个月缩短到2天内即可完成。因此PCR-SSCP可快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变,适用于结核分枝杆菌临床分离株的快速检测。 由于一般...

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