HCV Core蛋白诱导Cos-7细胞凋亡的研究

发布时间：2023-12-10 09:41

　　丙型肝炎病毒(HCV)是引起丙肝的病原体，在初次感染后常常转变成慢性持续性感染，从而易于导致肝硬化和肝癌，但关于其致癌机制迄今还不是很清楚，因此对HCV的病毒复制以及各个蛋白功能的研究非常重要，有利于阐明病毒复制及其在机体内致病的机理。Core蛋白是HCV的核心蛋白，具有多种功能，多个研究小组的研究表明Core蛋白能影响细胞的生长和分化，可能与HCV的致病性密切相关。 本论文研究了HCV 1型全长core基因(1-574bp)在真核细胞中的表达及其表达所引起的宿主细胞的变化。用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切pRSET-C获得全长core基因，将其插入到真核表达载体pCDNA3 CMV启动子下游，构建了重组真核表达质粒pCDNA3-Core。用脂质体LipoVec^TM将重组质粒pCDNA3-Core转染到人宫颈癌细胞Hela细胞系和猴肾细胞Cos-7细胞系中进行表达，设pCDNA3空质粒转染为空白对照，设pEGFP—N1质粒转染为阳性对照。免疫荧光实验检测了Core蛋白在Hela细胞系中的表达，但没有观察到较为明显的细胞变化。免疫斑点实验检测了Core蛋白在...

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
第一部分 文献综述
    一、 HCV的分子生物学特征
    二、 Core蛋白的研究进展
第二部分 研究论文
    第一章 HCV core基因在大肠杆菌中的表达及兔抗制备
        一、 前言
        二、 材料与方法
        三、 实验结果
            1 、 截短的core基因在BL21菌株中的表达
            2 、 ELISA检测结果
        四、 讨论
    第二章 HCV core基因在真核细胞中表达，引起Cos-7细胞凋亡
        一、 前言
        二、 材料与方法
        三、 实验结果
            1 、 重组真核表达载体pCDNA3-Core的构建及鉴定
            2 、 免疫荧光实验检测Core蛋白在Hela细胞系中的表达
            3 、 免疫斑点实验检测Core蛋白在Cos-7细胞中的表达
            4 、 Hoechst 33258荧光染色检测Cos-7细胞的凋亡
            5 、 DNA Ladder实验检测Cos-7细胞的凋亡
            6 、 GFP蛋白的表达
        四、 讨论
参考文献
研究生期间发表和待发表的论文
致谢



本文编号：3872259