空肠弯曲菌PEB1的B细胞免疫优势表位的鉴定及保护效果的评价

发布时间：2024-01-31 04:09

　　目的利用表位预测分析技术筛选空肠弯曲菌(C. jejuni)黏附蛋白PEB1的B细胞免疫优势表位,并评价其免疫保护效果。方法采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重叠肽段。ELISA系统筛选鉴定PEB1的B细胞免疫优势表位。采用KLH偶联免疫优势表位肽免疫BALB/c小鼠,ELISA测定优势表位肽诱导的IgG抗体效价。末次免疫后7 d,经口灌胃感染C. jejuni 11168,在感染后的28 d,定量检测感染攻毒后各组小鼠的空肠组织C. jejuni的定植量以及q RT-PCR技术检测炎性细胞因子TNF-α的相对表达水平。通过HL-60细胞调理吞噬实验测定表位肽诱导产生抗体所介导的调理吞噬杀伤功能。免疫B细胞缺失小鼠,感染攻毒后检测肠组织C. jejuni的定植量。结果 PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa均能与PEB1抗血清产生强烈IgG抗体反应。抗PEB155-72aa、抗PEB197-114aa和PEB1211-228aa血清均能与重组的PEB1产生较强的抗原抗体反应。与CFA/IFA组相比,免疫PEB155-72aa、PEB197-...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物及分组
    1.2 实验试剂
    1.3 肽段的合成与偶联
    1.4 动物的免疫
    1.5 抗体检测
    1.6 动物感染和空肠组织C.jejuni的定植检测
    1.7 实时荧光定量聚合酶链反应 (q RT-PCR) 检测
    1.8 抗体介导的调理吞噬作用
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 免疫PEB1重组蛋白对小鼠感染C.jejuni后的空
    2.2 B细胞免疫优势表位筛选及鉴定
    2.3 PEB1免疫优势表位发挥抗C.jejuni感染的免疫保护作用
    2.4 PEB1免疫优势表位介导的调理吞噬作用
    2.5 PEB1免疫优势表位介导的免疫保护依赖B细胞
3 讨论



本文编号：3890942