人胃癌裸鼠原位移植瘤动物模型的活体荧光观察及肿瘤分期研究

发布时间：2024-01-31 20:50

　　目的:建立人胃癌细胞MGC-803原位胃癌移植瘤模型,并运用可视荧光活体成像技术探讨原位移植瘤分期。方法:将人胃癌MGC-803细胞株进行质粒转染,获得稳定表达绿色荧光蛋白的MGC-803-GFP细胞株,皮下注射细胞成瘤后,分割成小块并手术移植到胃壁内,建立裸鼠胃癌原位移植瘤模型。动态观察原位移植瘤术后裸鼠的一般情况,活体成像技术下观察肿瘤的生长和转移,每周分批处死原位移植瘤祼鼠,结合组织病理学检测确定病理分期,分析术后时间、肿瘤荧光面积与病理分期之间的联系,拟以原位移植瘤术后生长的各个时间段,对肿瘤分期进行大致判定。结果:成功建立了稳定表达GFP的人胃癌细胞MGC-803原位胃癌移植瘤模型,通过可视荧光技术可以活体追踪观察肿瘤的生长和转移过程,且随着术后时间及荧光面积的增加,肿瘤病理分期越晚,而以术后3、5周为界,可初步在活体情况下将原位移植肿瘤分为早、中、晚期。结论:通过建立胃癌原位移植瘤模型,利用活体荧光技术可以再现肿瘤的临床演变过程,并以移植术后时间为节点可确定肿瘤的大致分期,为进一步对抗肿瘤药物疗效判定研究提供了实验基础。

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【文章目录】：
材料与方法
    1. 动物
    2. 试剂与仪器
    3. 细胞株的培养和质粒转染
        3.1 细胞株培养
        3.2 质粒的转化、扩增
        3.3 细胞转染
    4. 单克隆MGC-803-GFP细胞株的建立
        4.1 细胞株筛选
        4.2 获取单克隆MGC-803-GFP细胞株
    5. 裸鼠胃癌原位MGC-803-GFP移植瘤模型的建立
        5.1 MGC-803-GFP裸鼠皮下移植瘤的建立
        5.2 原位MGC-803-GFP胃癌移植瘤模型的建立
    6. 监测指标及肿瘤分期判定
        6.1 原位胃癌移植瘤术后小鼠活体荧光学观察
        6.2 解剖观察与组织病理学检测
        6.3 小鼠原位移植瘤病理分期及活体状态下时间节点判定
    7. 统计学方法
结果
    1.经转染后的MGC-803细胞绿色荧光蛋白表达情况
    2.MGC-803-GFP细胞荧光值检测结果
    3.裸鼠皮下移植瘤可见光生物成像结果
    4.裸鼠原位移植后一般情况
    5.原位移植瘤裸鼠可见光生物成像结果
    6.裸鼠胃癌原位移植瘤荧光定量与肿瘤生长曲线
    7. 解剖和组织病理学观察
    8. 小鼠原位移植瘤病理分期及活体荧光成像判定
讨论



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