基于临床肿瘤标本的胃癌转移模型建立

发布时间：2024-02-05 07:51

　　目的建立基于临床肿瘤标本的胃癌转移模型,为胃癌的转移研究提供个体化的动物模型。方法将胃癌新鲜的手术标本移植到裸鼠皮下,建立胃癌患者异种移植(Patient-derived xenograft,PDX)模型。进一步通过手术将皮下瘤组织原位移植到裸鼠胃部肌层,连续观察裸鼠的体征状态,通过近红外荧光活体成像技术检测肿瘤转移的发生。解剖荷瘤小鼠,将肺部转移灶进一步移植裸鼠皮下获得实体瘤。HE染色观察原发瘤与转移瘤的结构特征,(short tandem repeat)STR分析原发瘤和转移瘤的遗传特性。PCR-Array分析转移瘤和原发瘤中转移相关基因的表达。结果成功建立胃癌PDX模型,移植瘤组织结构与患者保持基本一致;通过胃部原位移植发现编号C19751的小鼠发生肺和肝的转移。其中肺转移灶皮下移植后获得了实体瘤,STR分析显示原发瘤保持了与肺转移瘤一致的遗传特征。PCR-Array结果显示,与原发瘤相比,转移瘤中CXCL12,IGF1和MMP2基因表达均显著上调。结论利用临床肿瘤标本成功建立胃癌转移模型,为胃癌转移研究提供了良好的个体化模型。

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【部分图文】：

图5PCR-Array分析

RT2ProfilerTMPCRArrayHumanTumorMetastasis试剂盒含有84个SYBR?Green优化的肿瘤转移相关基因引物，并含有相应的反应体系质量控制。实时定量PCR(real-timePCR）结果分析采用ΔΔCt方法。首先计算每个处理组中....

图2PDX模型STR检测

STR(shorttandemrepeat）检测所选取的16个位点具有种属特异性，是从人类的23对染色体中所挑选的等位基因，多态性程度高。STR由2～6个碱基构成一个核心序列，核心序列串联重复排列，序列和重复次数决定多态性[10]。检测结果表明，从人类染色体上选取的16个位点....

图3近红外荧光活体成像及转移灶

将3例临床胃癌手术标本采用裸鼠皮下移植的方法成功建立了PDX模型，进一步原位移植一个月后，C19751模型组显著消瘦，注射肿瘤靶向性NIRF染料，活体成像结果显示MHI-148染料特异性集聚在肿瘤部位；并同时在胃部、肝部和肺部出现荧光信号（图3A）。解剖小鼠后，肉眼可看到部分小鼠....

图4肺和肝转移瘤组织结构（H&E染色，×400，标尺=20μm)

图3近红外荧光活体成像及转移灶2.4胃癌转移相关基因的分析

本文编号：3895898