多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（pp-GalNAc-T2，E.C.2.4.1.4）的基因克

发布时间：2024-02-27 01:04

　　目的　多肽：N－乙酰氨基半乳糖转移酶是合成O－糖链的起始酶，而目前的研究认为，O-糖基化与分子及细胞识别、肿瘤的发生发展和转移以及胚胎发育等功能密切相关。鉴于国内对O-糖基化功能的研究尚在起步阶段，本文旨在获得稳定表达的pp-GalNAc-T2基因克隆以供进一步研究，并在mRNA水平观察pp-GalNAc-T2在不同人体组织中的分布，为以后的研究提供思路，方法采用Gateway克隆技术，以人脑cDNA库为模板克隆出pp-GalNAc-T2的可溶性部分；采用RT-PCR测定六种不同人体组织中pp-GalNAc-T2的表达，结果 1、利用人工合成的一对引物，以Marathon-ReadyTM人脑cDNA库为模板，成功地扩增到1条pp-GalNAc-T2 cDNA片段，经pDONRTM201克隆载体克隆扩增后抽提质粒并转入原核表达质粒pFASTBAC中，两个重组质粒均经线性化长度鉴定，或加以克隆PCR及测序鉴定后转染DH5α工程菌，SDS-PAGE电泳鉴定表达产物的分子量与文献报道基本相符。2、六种不同人体组织中，以胃肠道组织中pp-GalNAc-T2 mRNA表达水平较高，脑和心肌中等，而...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
引言
第一部分 多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的基因克隆、序列鉴定及其在大肠杆菌的表达
第二部分 多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2在不同正常组织中的表达
小结
参考文献
附录一 中英文缩写词表
附录二 攻读学位期间公开发表论文的情况
附录三 Gateway^TM Technology
致谢



本文编号：3912134