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JWA与α-微管蛋白结合的结构和功能关系研究

发布时间:2024-03-08 05:50
  人类疾病的发生往往由遗传因素和环境因素相互作用决定的。机体暴露于不同环境因素(应激因子)时,可在分子、细胞和整体等多个水平和层次作出相应的应答反应,启动复杂的细胞内和细胞间信号转导通路以及神经-体液-内分泌等调节机制,通过改变一系列基因的表达水平以及神经递质和激素等释放机制,最终使细胞、组织器官乃至整个机体在各种生理、生化功能和协调功能等方面获得新的平衡,从而在一定限度内维持机体正常的生命活动。探讨基因与环境的相互作用及其规律,有助于进一步理解和认识环境因素导致疾病的分子机制,从而为从分子水平上构建环境因素致机体损伤的预警体系提供科学依据。1998年,周建伟等从培养的原代人的气管和支气管上皮细胞中,利用差异显示高通量筛选技术,分离克隆了一个在生物进化上保守、参与调节细胞分化和凋亡的新基因JWA,进一步研究发现,该基因编码一种新的细胞骨架相关蛋白。本课题组随后用多种分子和细胞生物学实验手段证实JWA蛋白与微管蛋白β亚单位紧密结合,在细胞内与其分布基本平行,并在对环境物理化学因素的应答(聚合或解聚)中表现出与微管(β亚单位)同步的动力学变化,并可能参与细胞有丝分裂过程。JWA基因受多种分化...

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2冰上处理PC12细胞不同时间后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情况(xl000)

图2冰上处理PC12细胞不同时间后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情况(xl000)

用荧光显微镜对JWA蛋白在PC12细胞内的分布进行了观察.结果显示,冰上处理PC12细胞不同时间(图2),JWA蛋白和a一微管蛋白均发生不同程度的解聚;冰上处理PC12细胞Zh,37℃恢复不同时间后(图3),J认钱蛋白和a一微管蛋白均逐步聚合,表明在微管聚合和解聚的过程中,JWA....


图4J认叭蛋白和a一微管蛋白在PC12细胞有丝分裂过程

图4J认叭蛋白和a一微管蛋白在PC12细胞有丝分裂过程

图2冰上处理PC12细胞不同时间后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情况(xl000)(a)试e)对照组,(d)代幻处理10min,(g)~(i)处理30min,Q)以l)处理60而n.(a),(d),(g),臼)罗丹明标记a一微管蛋白(红色):(b),(e),(h),(k)F一TC标....


图3PC12细胞冰上冷处理Zh后再37℃恢复不同时间后微管和JWA蛋白聚合情况(x1000)

图3PC12细胞冰上冷处理Zh后再37℃恢复不同时间后微管和JWA蛋白聚合情况(x1000)

图2冰上处理PC12细胞不同时间后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情况(xl000)(a)试e)对照组,(d)代幻处理10min,(g)~(i)处理30min,Q)以l)处理60而n.(a),(d),(g),臼)罗丹明标记a一微管蛋白(红色):(b),(e),(h),(k)F一TC标....


图5有丝分裂纺锤体形成期PC12细胞的激光共聚焦显微镜观察结果

图5有丝分裂纺锤体形成期PC12细胞的激光共聚焦显微镜观察结果

为进一步阐明JWA蛋白在有丝分裂纺锤体形成期的分布特征,用激光共聚焦显微镜进行观察.结果显示,在有丝分裂纺锤体形成期(图5),完全解聚的a一微管蛋白和部分解聚的J从rA蛋白共同形成纺锤体,部分JWA蛋白分布在染色体的周围,与免疫荧光的结果一致.以上结果说明在间期细胞中,JWA蛋白....



本文编号:3922102

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