Wnt3a在牛滋养层干细胞建系中的作用研究

发布时间：2024-02-25 18:19

　　胎盘作为一种暂时性的营养器官,负责了胚胎植入后发育过程中所需一切营养物质的供给。因此,胎盘功能若出现异常将严重影响胚胎发育进程甚至造成妊娠失败。滋养层干细胞(trophoblast stem cell,TSC)作为胎盘滋养层的前体细胞,具有在体外分化形成所有胎盘滋养层细胞的能力。因此,滋养层干细胞是研究滋养外胚层分化、滋养层细胞谱系确立以及胎盘形成的有力细胞模型,而在体外建立性质稳定且拥有较强自我更新能力的滋养层干细胞系将是开启胎盘研究的基础和关键环节。2i培养体系因包含PD0325901和CHIR99021两种抑制剂分子而得名,前者是MEK/ERK信号通路抑制剂,而后者为GSK-3β抑制剂。该体系最初被报道用于小鼠和大鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)的体外培养,利用2i培养体系结合持续分泌Wnt3a蛋白的L细胞与小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)作为混合饲养层我们成功建立牛TSC细胞系(BTS-1),为了深入探究Wnt3a及其对应WNT信号通路在牛TSC体外建系中的作用,我们进行了以下研究:1.不同培养体系...

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图1小鼠胚胎发育及TSC微环境示意图

16图1小鼠胚胎发育及TSC微环境示意图该图基于文献[25]图4绘制。Fig.1MouseembryodevelopmentandnichesofTSCs

图2小鼠TSC类型及其集落的不同形态

型集落；（B）Ⅱ型集落；（C）Ⅲ型集落，箭头所示区域为集落中松散的堆叠）Ⅳ型集落，黑色箭头所示区域为堆叠状细胞团簇，白色箭头所示为小鼠；（E）尺寸较小的小鼠TSC，箭头所示为细胞表面的胞质突起结构；（F）TSC，白色箭头所示为细胞核，黑色箭头所示为核仁。（A-D）中虚线框内....

图1.1体外受精牛囊胚

40图1.1体外受精牛囊胚体外受精后第7-8d的扩张囊胚形态，ICM清晰可见。标尺，200μmFig.1.1Invitrofertilizationblastocysts

图1.2不同培养体系下囊胚来源细胞集落形态

44图1.2不同培养体系下囊胚来源细胞集落形态Fig.1.2Thecolonymorphologyofcellsderivedfromblastocystsindifferentculturesystems

本文编号：3910704