乳酸氧化酶的改良及其对秸秆青贮处理的促进作用

发布时间：2024-04-27 22:32

　　我国作为一个农业大国,每年农作物秸秆产量惊人,由于缺少有效的解决方案,存在地区性、季节性、结构性的秸秆过剩等问题。农村的秸秆焚烧甚至引起了严重的污染空气,而且由于有机质没有归还土壤,造成土壤板结,肥力减退。秸秆的饲料化加工有利于高秸秆利用率、转化率及其相关经济效益,而秸秆的青贮处理是其饲料化过程中的关键环节。在反刍动物的饲料中添加青贮秸秆,可以有效高反刍动物的对饲料的干物质摄入量,促进粗饲料的瘤胃转化率。然而,反刍动物的瘤胃是pH中性环境,青贮秸秆中含有大量的乳酸会对反刍动物的健康造成不利影响。乳酸氧化酶是一种能够将乳酸转化为丙酮酸的生物酶,因此在饲喂前添加可以有效降低青贮秸秆中的乳酸含量,并且所产生的丙酮酸能为大多数瘤微生物进一步利用。同时这一反应过程消耗氧气,这将有利于瘤胃形成厌氧环境。因此,本研究通过微生物的富集分离技术与分子生物学方法,研究了乳酸氧化酶强化秸秆青贮处理的过程与机制。主要研究结果如下:(1)从安格斯肉牛瘤胃液中富集分离筛选得到了一株兼性厌氧细菌-鹑鸡肠球菌,并从中克隆得到了乳酸氧化酶(EgLOD)的基因,序列分析表明:EgLOD基因全长1104kb,编码368个氨...

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图2-1乳酸氧化酶基因序列图

图2-1乳酸氧化酶基因序列图Fig2-1Thegenomesequencediagramoflactateoxidase2.3.3乳酸氧化酶基因克隆

图2-2EgLOD基因扩增Fig2-2PCRamplificationofEgLOD

证结果如图2-2所示，1200bp左右，与所预结果显示，所得到的片这个乳酸氧化酶基因MG547691。经Signa

图3-1一轮overlapPCR产物Fig3-1FirstPCRamplificationofEgLOD

图3-1一轮overlapPCR产物Fig3-1FirstPCRamplificationofEgLOD直接转化，菌落PCR验证显示EGLOG成功连接达载体上的EgLOD在BL21及JM109中均能够成BL21表达宿主本身就含有乳酸氧化酶，能够产生....

图3-2EgLODSDS-PAGE蛋白电泳图

1FirstPCRamplificationof落PCR验证显示EGLEgLOD在BL21及JM1主本身就含有乳酸氧化而言，乳酸氧化酶在JL，因此选择在BL21中-EgLOD和BL21-30a-E时，但经过纯化后所得活；而后者仅需与镍珠透液与洗脱液中酶活....

本文编号：3965800