Transwell细胞龛室环境下绵羊肌源性干细胞与阴道平滑肌细胞体外共培养的研究
【图文】：
翁?阎鸾ソ咏?VSMC。见图1。2．2Westernblot法检测绵羊MDSC与VSMC共培养诱导分化后MDSC中细胞标记物表达情况共培养6d时，干细胞标记物Desmin在共培养组MDSC中仍有表达，但表达量随着时间延长而下降，与MD-SC单独培养组比较，表达量显著下降(P＜0．05)。随着MDSC干细胞标记物表达下降的同时，平滑肌细胞抗体a-SMA表达量逐渐上升;但共培养6d时，a-SMA表达量仍低于VSMC单独培养组(P＜0．05)。表明通过与VSMC共培养，MDSC一部分可逐渐被诱导分化为平滑肌细胞，同时仍有少部分MDSC保持着干细胞标记物的表达。见图2。图1Transwell细胞龛室体外模拟MDSC与VSMC共培养(×10)A、B:分别为对照组MDSC1、4d;C、D:共培养组MDSC1、4d;E:VSMC单独培养4d图2Westernblot法检测Desmin和a-SMA表达对照组MDSC:MDSC单独培养组培养6d;对照组VSMC:VSMC单独培养组培养6d3讨论共培养是目前细胞生物学领域常用的一项技术［4－5］。既往研究［6，3］利用HoechsG3342染料对MDSC细胞核进行标记，再与阴茎海绵体平滑肌细胞共培养2d，检测MDSC表达平滑肌细胞标记物a-SMA表达情况。但此法存在一些局限性:(1)Ho-echsG3342染料对MDSC细胞核染色时间有限，仅能了解共培养2d的情况，无法进行更长时间的观察;(2)MDSC与平滑肌细胞发生细胞融合(即MDSC的细胞核进入平滑肌细胞中)，也可出现核染色阳性。此时，MDSC并未分化为平滑肌细胞，但由于细胞核在平滑肌细胞中，因此该细胞也表现出核染色阳性且可检测到a-SMA表达，导致假阳性;(3)该法难以分离共培养后的MDSC，故无法确切了解MDSC诱导分化为平滑肌细胞的情况。因此，a-SMA是否均为MDSC诱导分化后新表达出的标记物仍待商榷。本研究通过Transwell细胞龛室首次建立了绵羊MDSC与VSMC共培养体外模型，模
?上赴?昙俏顳esmin在共培养组MDSC中仍有表达，但表达量随着时间延长而下降，与MD-SC单独培养组比较，表达量显著下降(P＜0．05)。随着MDSC干细胞标记物表达下降的同时，平滑肌细胞抗体a-SMA表达量逐渐上升;但共培养6d时，a-SMA表达量仍低于VSMC单独培养组(P＜0．05)。表明通过与VSMC共培养，MDSC一部分可逐渐被诱导分化为平滑肌细胞，同时仍有少部分MDSC保持着干细胞标记物的表达。见图2。图1Transwell细胞龛室体外模拟MDSC与VSMC共培养(×10)A、B:分别为对照组MDSC1、4d;C、D:共培养组MDSC1、4d;E:VSMC单独培养4d图2Westernblot法检测Desmin和a-SMA表达对照组MDSC:MDSC单独培养组培养6d;对照组VSMC:VSMC单独培养组培养6d3讨论共培养是目前细胞生物学领域常用的一项技术［4－5］。既往研究［6，3］利用HoechsG3342染料对MDSC细胞核进行标记，再与阴茎海绵体平滑肌细胞共培养2d，检测MDSC表达平滑肌细胞标记物a-SMA表达情况。但此法存在一些局限性:(1)Ho-echsG3342染料对MDSC细胞核染色时间有限，仅能了解共培养2d的情况，无法进行更长时间的观察;(2)MDSC与平滑肌细胞发生细胞融合(即MDSC的细胞核进入平滑肌细胞中)，也可出现核染色阳性。此时，MDSC并未分化为平滑肌细胞，但由于细胞核在平滑肌细胞中，因此该细胞也表现出核染色阳性且可检测到a-SMA表达，导致假阳性;(3)该法难以分离共培养后的MDSC，故无法确切了解MDSC诱导分化为平滑肌细胞的情况。因此，a-SMA是否均为MDSC诱导分化后新表达出的标记物仍待商榷。本研究通过Transwell细胞龛室首次建立了绵羊MDSC与VSMC共培养体外模型，模拟MDSC在VSMC环境下的扩增和分化情况。Transwell细胞龛室通过多孔膜，下层培养液中的成分可影响到上室内的细胞，从而可研?
【参考文献】
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本文编号：2891784
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