α-SMA和Integrin-β 1 在人增生性瘢痕力学模型中的表达

发布时间：2023-04-17 00:41

　　目的在建立的人增生性瘢痕力学模型上,通过给予不同时间段的持续的机械加载张力,研究正常的人体成纤维细胞转化为增生性瘢痕成纤维细胞的过程中α-SMA和Intergin-β₁的表达及意义。为进一步研究α-SMA和Intergin-β₁的表达对增生性瘢痕形成提供理论依据。方法取增生性瘢痕患者接受瘢痕切除术后获得的瘢痕组织和正常皮肤真皮组织,通过组织块体外培养法分别培养出增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)和正常皮肤成纤维细胞(NSFB),酶消化法获取第4-8代细胞进行相关实验研究。将两种细胞分别设立机械牵张组(实验组)和不牵张组(对照组)。运用多通道应力加载系统,给予实验组细胞0.1Hz、10%牵张幅度和正弦波形的周期性机械牵张力,每天持续牵张时间为4h,时间段设定为³d、⁵d、⁷d;不加载机械牵张力的对照组正常培养条件下培养相同的时间。实验组和对照组细胞培养到3d、5d、7d后,对各组细胞分别进行以下检测:细胞免疫化学染色(ICC)检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,细胞免疫荧光染色(...

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【学位级别】：硕士

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摘要
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引言
第1章 材料与方法
    1 实验标本与材料
        1.1 实验标本来源
        1.2 实验仪器设备
        1.3 实验试剂
第2章 实验方法
    1 实验分组及实验条件
    2 细胞的分离培养、传代、冻存及复苏
        2.1 细胞的分离培养
        2.2 细胞的传代
        2.3 细胞的冻存
        2.4 细胞的复苏
    3 细胞免疫化学染色(Immunocytochemical staining,ICC)
        3.1 样品准备
        3.2 操作步骤
    4 细胞免疫荧光染色(Immunofluorescence,IF)
        4.1 样品准备
        4.2 操作步骤
    5 蛋白免疫印迹(Western blot,WB)
        5.1 总蛋白的提取及样品制备
        5.2 Western blot
    6 统计学分析
第3章 实验结果
    1 PCNA在不同处理组细胞中的表达情况
    2 α-SMA的表达情况
    3 Integrin-β₁ 的表达情况
第4章 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录或缩略词表
致谢



本文编号：3792213