睾丸间质细胞Prl3c1过表达转基因小鼠建立与生物学功能初步研究

发布时间：2024-03-16 06:49

　　实验目的:Prolactin family 3,subfamily c,member 1(Prl3c1)是泌乳素(PRL)家族成员之一。与大多数PRL家族成员不同,Prl3c1是一种新型催乳素样基因,主要在雌性胚胎植入位点的蜕膜细胞表达,对妊娠维持起重要作用。本课题组前期发现Prl3c1表达于雄性睾丸间质细胞中并且18天C57BL/6雄性小鼠组的Prl3c1 mRNA和蛋白表达低,成年组表达增加达高峰,老年组表达降低。鉴于Prl3c1表达水平与体内睾酮水平随年龄变化趋势一致,推测其体内功能可能与间质细胞功能有关。因此本研究拟建立睾丸间质细胞Prl3c1过表达转基因小鼠并对其生物学功能进行初步研究。实验方法:1.设计引物扩增insulin like 3(Insl3)、Prl3c1、Insl3PA片段,通过融合PCR,形成Insl3-Flag-Prl3c1-Insl3PA片段,构建pPrl3c1转基因载体,测序验证。2.用受精卵原核显微注射法建立Prl3c1转基因小鼠模型。3.用免疫荧光和western blot方法鉴定Prl3c1转基因表达情况。4.用HE染色的方法观察Prl3c1转基因...

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【部分图文】：

图1.3融合产物电泳及回收鉴定图

21图1.3融合产物电泳及回收鉴定图e1.3ElectrophoresisoffusionPCRproducts.M:200bpMark是Insl3-Flag-Prl3c1-mInsPA的电泳图谱，右图是产物纯化回段的获取结果EGFP表达框，切胶纯化回收....

图1.6载体酶切分析及回收鉴定电泳图谱

图1.6载体酶切分析及回收鉴定电泳图谱Figure1.6RestrictionendonucleasedigestionpatternofrecombinantpEASY-blunt-Prl3c1and18T-EGFP.M:1KbladderMarker....

图1.8转基因小鼠PCR鉴定（A）与测序验证（B）

图1.8转基因小鼠PCR鉴定（A）与测序验证（B）.8TransgenticmicewereidentifiedbyPCRandverifiedbyDNAsequen的五十年里，工业化国家的人口总生育率明显下降[9]，WHO报题将成为第三大疾病，仅....

图3.dSTAR与CYP11A1在小炙辛丸中表达F蟀m}.dQVeaterahlatanalysesofSTARandCYP11A1piatemlevelsmmicethisWT.Pr13c1过表达小炙.WT.野生型对鱿小炙.

重庆医科大学硕士研究生学位论文3.5Prl3c1过表达抑制HCG诱导的STAR表达上调为了研究Prl3c1过表达参与睾酮产生的可能机制，我们利用westernblot方法分析了上述各组小鼠睾丸STAR与CYP11A1蛋白表达情况。结果显示野生组与转基....

本文编号：3929273