人类β疱疹病毒HHV-6B衣壳及衣壳结合间层复合物（CATC）的冷冻电镜原子分辨率结构研究

发布时间：2024-04-18 19:13

　　人类疱疹病毒6B型(HHV-6B)主要与玫瑰疹、神经退化疾病等相关,属于β疱疹病毒亚家族。β疱疹病毒与α和γ疱疹病毒亚家族成员的显著区别在于其β疱疹病毒特异性磷酸化蛋白,即包括HHV-6B病毒中的pU11蛋白,也包括人类巨细胞病毒(HCMV)中的pUL32/pp150蛋白。在人类巨细胞病毒(HCMV)中,pp150蛋白在HCMV衣壳表面形成衣壳结合间层蛋白复合物(CATC,capsid-associated tegument complex)网状结构。CATC 具有多种生物学功能,关键作用之一是维持其内部235kb大型基因组产生的巨大压力,进而确保HCMV病毒衣壳的机械强度。为了理解疱疹病毒衣壳组装机制,尤其是pU11蛋白的结构与功能,本文报道了利用冷冻电子显微镜技术解析的第一个HHV-6B病毒近原子分辨率结构及相关蛋白原子模型。与其他β疱疹病毒相比,HHV-6B病毒衣壳蛋白的结构呈现一定相似性,但是CATC的结构和组织形式存在巨大差异。在HHV-6B病毒中,我们观察到180个“vA”形的四聚体CATC,这与小鼠巨细胞病毒(MCMV)中观察到的255个“”形二聚体CATC,以及在HCM...

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１冷冻电镜技术解析生物学分子髙分辨率结构的流程图Ｉ３７】??１??

电子显微镜（ＴＥＭ，ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）对低温冷冻环境（液氮环??境）的电子辐射敏感样品进行成像１３５１并利用计算机图像处理方法重建样品结??构（图１．１）。前沿科技不断提高冷冻电镜技术的结构解析能力和分辨率极限。??硬件层面，增强图....

图１．２负染样品与快速冷冻玻璃态样品丨８?Ａ分辨率重构比较叩??注：（ａ）图中左上为人类?ａｎａｐｈａｓｅ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ?ｃｏｍｐｌｅｘ／ｃｙｃｌｏｓｏｍｅ?（ＡＰＣ／Ｃ）负染??图像数据

样品的相互作用信息，电镜镜筒需要处于高度真空环境，而样品需要维持固体状??态。为了使生物样品可以被电镜观察，早期使用重金属盐溶液染色并进行干燥处??理［４〇］。染色使样品结构表现为负衬度（图１．２），所以又称这种处理方法为负染??（ｎｅｇａｔｉｖｅｓｔａｉｎｉｎｇ）?［４１］。负....

图１．３包络函数影响的ＣＴＦ函数在不同欠焦值示意图（Ｂｙ?ｓｐｉｄｅｒ）??虽ＴＥＭ成理论立己，生，

该频率对应的图像信息丢失。此外图像的傅立叶高频信号（图像高分辨细节）的??振幅被某种包络函数影响，包络函数的振幅下降率与电子束的相干性（ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ）??以及欠焦值的大小有关（图１．３）。也就是说，欠焦值越大，图像低频信号的衬度??越强，但高频信号的衬度越弱，重建结构所需要....

图１．４透射电子显微镜结构示意图??（Ｂｙ?ｋａｌｌｅｒｎａ?ｖｉａ?Ｗｉｋｉｍｅｄｉａ?Ｃｏｍｍｏｎｓ）??６??

该频率对应的图像信息丢失。此外图像的傅立叶高频信号（图像高分辨细节）的??振幅被某种包络函数影响，包络函数的振幅下降率与电子束的相干性（ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ）??以及欠焦值的大小有关（图１．３）。也就是说，欠焦值越大，图像低频信号的衬度??越强，但高频信号的衬度越弱，重建结构所需要....

本文编号：3957616