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牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K催化结构域基因克

发布时间:2024-05-25 10:48
  牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis,简称Pg)是牙周炎的重要优势致病菌,牙龈蛋白酶是P.gingivalis的重要致病因子。牙龈蛋白酶K(gingipain K,简称KGP)基因全长由6.4Kbp组成,前22个氨基酸为信号肽,接下来23~229残基是N-端前序列,230~739个氨基酸为成熟肽蛋白酶结构域(KGPcd),740~1723的氨基酸为β亚单位即凝集素结构域。KGPcd为KGP的生物活性部分,β亚单位其保守的位点几乎存在于所有P.gingivalis,并具有粘附、凝集功能。由于近年来分子生物学和免疫学的发展,牙龈蛋白酶基因已被克隆和测序,对其蛋白质分子中的各个功能区、抗原表位及相应的编码基因片段已有了更深入的了解,为研制疫苗提供了可靠的依据。 本课题为研究基因免疫在预防牙周炎中的作用,采用分子生物学技术,对P.gingivalis KGPcd进行了克隆、原核表达和纯化,并制备了抗KGPcd抗体;同时构建KGPcd真核表达质粒,并免疫SD大鼠,观察其在防治牙周炎中的作用,实验结果表明:KGPcd可作为基因候选疫苗,有减...

【文章页数】:108 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
正文
    第一部分 P.gingivalis KGPcd基因克隆、表达、纯化及抗体制备
        1 kgpcd基因克隆及其序列分析
        2 KGPcd在大肠杆菌中的表达
        3 抗KGPcd抗体的制备
    第二部分 KGPcd基因疫苗的制各及预防牙周炎的实验研究
        1 真核表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达
        2 pcDNA3.1(+)/kgpcd免疫原性研究
        3 基因疫苗预防牙周炎的实验研究
全文总结
简历和发表文章
致谢
附录



本文编号:3982020

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