体外沉默法尼基转移酶对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响

发布时间：2024-06-30 01:01

　　目的 通过RNA干扰沉默法尼基转移酶(FTase),探讨沉默FTase对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法 针对FTase设计并构建3条小干扰RNA(siRNA),转染人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞(实验组),同时设置阴性对照组(转染NC-siRNA)和空白对照组(不转染siRNA)。应用实时荧光定量PCR检测各组细胞FTase、HRAS的mRNA表达,根据FTase mRNA的表达量,选取沉默效率最高的FTase-siRNA转染组作为进一步研究的实验组。蛋白质免疫印迹法检测各组细胞FTase、HRAS、p65、p-p65(S536)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果 与阴性对照组和空白对照组相比,实验组FTase的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),HRAS的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p-p65(S536)、MMP-9、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降(P<0....

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【部分图文】：

图1各组细胞FTase、HRASmRNA的表达

Transwell侵袭实验结果表明,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组细胞通过Matrigel胶迁移到小室膜下的数量降低,表明实验组细胞侵袭能力降低(P<0.05)(图5)。图2各组细胞FTase、HRAS蛋白的表达

图2各组细胞FTase、HRAS蛋白的表达

图1各组细胞FTase、HRASmRNA的表达2.5各组细胞的迁移能力

图3CAL27细胞转染FTase-siRNA后各组蛋白的表达

舌鳞状细胞癌是最常见的口腔癌,生长快、浸润性强、颈淋巴结转移率高,是导致舌鳞状细胞癌患者死亡率高的重要原因。因此,深入探讨其侵袭和转移的机制意义重大。RAS家族成员(HRAS、KRAS、NRAS)是人类癌症中最常见的突变癌基因。亚洲人群口腔癌中以HRAS突变率最高,而西方国家头颈....

图4SCC-4细胞转染FTase-siRNA后各组蛋白的表达

图3CAL27细胞转染FTase-siRNA后各组蛋白的表达Ras蛋白必须通过翻译后修饰与细胞膜结合,才能获得其致癌活性。1995年Kohl等[26]动物研究表明,在HRAS突变的转基因小鼠乳腺和唾液腺肿瘤中应用FTase抑制剂可抑制肿瘤的生长。另有研究[27]表明,....

本文编号：3998159