靶向沉默c-Met基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及其机制研究

发布时间：2024-04-14 23:16

　　目的:探讨靶向沉默肝细胞生长因子受体(c-Met)基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法:通过脂质体将特异性c-Met siRNA1和c-Met siRNA2转染至膀胱癌T24细胞,设为si-c-Met1组和si-c-Met2组,转染非特异性c-Met siRNA的T24细胞设为NC组,同时设置空白对照组(Blank组),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组T24细胞c-Met的表达,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况,克隆形成实验检测各组细胞对放射敏感性的影响,流式细胞术检测放射后细胞凋亡变化,Western blot检测放射对细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和磷酸化的蛋白激酶B (p-AKT)蛋白表达的影响。结果:si-c-Met1组和si-c-Met2组细胞中c-Met mRNA和蛋白表达较Blank组明显降低(P<0.05),转染c-Met siRNA2干扰效果更好。靶向沉默c-Met基...

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【部分图文】：

图1Westernblot检测各组膀胱癌T24细胞中c-Met蛋白表达情况

MTT法检测Blank组、NC组和si-c-Met2组T24细胞转染24、48、72h的A值,结果见表2所示,3组间相同时间点的A值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。说明靶向沉默c-Met基因对膀胱癌T24细胞的增殖能力无较大影响。2.3沉默c-Met基因增强T24细胞....

图2放射后各组膀胱癌T24细胞剂量存活曲线

表3各组膀胱癌T24细胞经不同剂量照射后克隆形成数目比较(xˉ±s)Tab.3ComparisonofclonesnumberformedbyT24cellsindifferentgroupsafterirradiationwithdif....

图3流式细胞仪检测各组T24细胞凋亡率

图2放射后各组膀胱癌T24细胞剂量存活曲线表4各组T24细胞经0Gy和4Gy照射后细胞凋亡率比较(xˉ±s)Tab.4ComparisonofapoptosisratesofT24cellsineachgroupafter0Gyand....

图4Westernblot检测T24细胞中蛋白表达情况

表4各组T24细胞经0Gy和4Gy照射后细胞凋亡率比较(xˉ±s)Tab.4ComparisonofapoptosisratesofT24cellsineachgroupafter0Gyand4Gyirradiation(x....

本文编号：3955377