短肽抑制剂FLPNF抑制hIAPP的聚集及其相关分子机制的实验研究

发布时间：2024-06-14 04:53

　　背景:蛋白质在体内由于错误折叠而形成淀粉样聚集会导致一系列蛋白质构象病,如2型糖尿病、阿尔茨海默病、帕金森病及其他一些神经系统退行性疾病。在2型糖尿病患者胰岛中及胰岛移植后胰岛β细胞内外常见淀粉样蛋白聚集,这种淀粉样蛋白聚集的主要成分为人胰岛淀粉样多肽(hIAPP),hIAPP形成的淀粉样聚集被认为是造成2型糖尿病及胰岛移植物失活的重要原因之一。因此研究hIAPP的聚集性及对胰岛β细胞功能的损害,探讨如何减少胰岛中错误折叠的hIAPP聚集正日益受到国内外学者的重视。人胰岛淀粉样多肽由37个氨基酸组成,在胰岛细胞中的合成及分泌过程与胰岛素同步。hIAPP在生理状态下与胰高血糖素、胰岛素共同调节和维持人体血糖平衡;而在病理状态下,由于hIAPP的结构具有极强的自我聚集倾向,聚集过程形成的寡聚体及纤维体会对β细胞造成功能损害,导致β细胞死亡。有研究提出hIAPP可能由于芳香族残基的π-π相互作用,导致hIAPP的相互作用而形成淀粉样纤维沉积,所以含有芳香族氨基酸较多的区域也是造成hIAPP聚集的关键区域。目前减少hIAPP聚集的方法主要包括以下3方面:降低体内hIAPP的表达;提高错误折叠h...

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图1人IAPP与鼠IAPP氨基酸序列的差异[20]

图1人IAPP与鼠IAPP氨基酸序列的差异[20]。1987年，Deleage等将hIAPP的二级结构进行了预测，hIAPP有三个可能形成β折叠的区域，包括20-29的纤维化核心区域，30-37的C端区域及14-18区域[21]。还有一些研....

图3荧光显微镜观察各短肽在PBS缓冲液环境下对hIAPP聚集的影响(空白对照：含20μMThT的PBS缓冲液；200×)

12图3荧光显微镜观察各短肽在PBS缓冲液环境下对hIAPP聚集的影响(空白对照：含20μMThT的PBS缓冲液；200×)3.2.2化学发光仪测定短肽抑制hIAPP聚集情况化学发光仪分别测定于24小时及48小时各组的荧光强度，结果显示加入hIA....

图4化学发光仪测定各短肽对hIAPP聚集的影响(A：24小时，B：48小时，NC：含20μMThT的PBS缓冲液)

图4化学发光仪测定各短肽对hIAPP聚集的影响(A：24小时，B：48小时，NC：含20μMThT的PBS缓冲液)3.3缓冲液中短肽抑制hIAPP聚集的量效关系研究3.3.1荧光显微镜观察短肽的最佳抑制浓度上述实验证明FLPNF及ANFLVH可....

图5荧光显微镜观察不同浓度的FLPNF于24小时(A)、48小时(B)；ANFLVH于24小时(C)、48小时(D)抑制hIAPP聚集的情况(200×)

15图5荧光显微镜观察不同浓度的FLPNF于24小时(A)、48小时(B)；ANFLVH于24小时(C)、48小时(D)抑制hIAPP聚集的情况(200×)。3.3.2化学发光仪检测短肽的最佳抑制浓度硫黄素T染色，化学发光仪测定不同浓度、不同时间点....

本文编号：3994170