光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究

  本文关键词：细胞外信号调节激酶在氨基酮戊酸—光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《宁夏医科大学》 2013年

细胞外信号调节激酶在氨基酮戊酸—光动力疗法杀伤皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制的研究

张秀娟  

【摘要】：目的探讨细胞外信号调节激酶（Extracellular-signal Regulated Protein KinaseERK）在δ-氨基酮戊酸光动力疗法（5-Aminolevulinic Acid for PhotodynamicTherapy ALA-PDT）杀伤皮肤鳞状细胞癌(Squamous Cell Carcinoma SCL-1)细胞中的作用及机制，为ALA-PDT治疗皮肤鳞状细胞癌提供新的实验室依据。 方法将SCL-1细胞分为空白对照组（con组），红光照射组，ALA组，ALA-PDT组，ERK阻断剂组。用western-blot检测各组细胞干预30min，60min，90min后ERK1/2蛋白产物及磷酸化ERK1/2蛋白产物的表达；用细胞免疫荧光化学法检测各组细胞干预30min，60min，90min后磷酸化ERK1/2蛋白产物的表达；用MTT酶联免疫法检测各组细胞干预24h，48h，72h后的光密度值，计算细胞的存活率；用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞干预后24h，48h，72h细胞的凋亡率；用电子显微镜技术观察各组细胞干预后24h，48h，72h细胞超微结构的变化。 结果经western-blot检测，ERK1/2蛋白产物在各组细胞中表达差别无统计学意义，磷酸化ERK1/2在空白对照组、红光照射组、ALA组细胞中的表达无明显差别，在ALA-PDT组细胞中的表达明显高于其余各组，在ERK阻断剂组细胞中的表达明显低于其余各组；细胞免疫荧光化学检测的结果和western-blot一致；MTT检测结果表明，，空白对照组、ALA组及红光照射组之间相比细胞存活率无明显差别，ALA-PDT组细胞的存活率与空白对照组、ALA组、红光照射组之间相比明显降低，ERK阻断剂组细胞的存活率与空白对照组、ALA组、红光照射组、ALA-PDT组之间相比更加降低；流式细胞仪检测结果表明，空白对照组、ALA组及红光照射组之间相比细胞凋亡率无明显差别，ALA-PDT组细胞的凋亡率与空白对照组、ALA组、红光照射组之间相比明显升高，ERK阻断剂组细胞的凋亡率与空白对照组、ALA组、红光照射组、ALA-PDT组之间相比更加升高；电子显微镜检测结果表明，空白对照组、ALA组及红光照射组之间相比较细胞超微结构变化无差别，ALA-PDT组与其余各组相比细胞损伤明显，ERK阻断剂组与其它各组相比细胞损伤更明显。 结论阻断ERK通路可以降低SCL-1细胞内p-ERK1/2的表达；增强ALA-PDT对SCL-1细胞的杀伤作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.5
【目录】：

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