CT259、CT703基因在沙眼衣原体感染细胞中的表达研究

发布时间：2021-11-15 05:57

　　目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）L₂血清型在急性感染和持续感染两种状态下,其基因CT259、CT703的mRNA及蛋白表达,为进一步研究两基因的生物学效应奠定实验基础。方法1.用IFN-γ处理Ct感染的HeLa细胞,吉姆萨染色光学显微镜观察、以及电镜观察,确定沙眼衣原体持续感染细胞模型建立。2.采用RT-PCR方法检测基因CT259、CT703 mRNA在不同细胞模型中的表达。3.采用Western-blot的方法检测基因CT259、CT703编码蛋白在不同细胞模型中的表达。结果1.成功建立Ct持续感染细胞模型。2.RT-PCR结果显示:Ct持续感染状态下,在宿主细胞中6h开始检测到CT259的表达,12小时开始检测到CT703的表达,持续感染状态下CT259、CT703的表达量无时间依赖性;Ct急性感染状态下,在宿主细胞中6小时开始检测到CT259的表达,12小时开始检测到CT703的表达,随感染时间的延长CT259、CT703 mRNA表达量逐渐增加,具时间依赖性。将持续感染与急性感染各相同时间点CT259、CT703 m... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

吉姆萨染色光学显微镜下观察Ct感染HeLa细胞(放大倍数:10x40)

硕士学位论文第二章结果dyeing.ArrowsindieatetheCt’5inelutions.A15oh，B15Ctinfeeted24hwithoutIFN一Y，C15Ctinfected48hwithoutIFN一Y，D15Ctinfeeted24hinelusionIFN一Y，andD15Ctinfeeted48hinclusionIFN一Y.2.1.2透射电镜下检测Ct包涵体在50cm2的细胞培养瓶内接种HeLa细胞，待细胞长成单层后加入1Mol的LZ型Ct。用不含IFN一y的DMEM完全培养基培养ct感染的HeLa细胞，在感染后的24h、48h收集细胞，经过处理，透射电镜下观察，可见:包涵体内出现大量的体积小、致密的EBS，少量RBs(如图ZA、ZC)。用含0.2ng/mlIFN一Y的DMEM完全培养基培养ct感染的HeLa细胞，在感染后的24h、48h收集细胞，经过处理，透射电镜下观察到:包涵体内出现大量RBS，且RBs形态异常增大，疏松，不见成熟EBs(图ZB、ZD)。

第二章结rueturalanalysisbyeleetronmieroseoPyofCt一infeetedHeLawsindieatetheEBsandthedoublearrowsindicatetheenlarge，5acuteinfection24h，B15acuteinfection48h，C15Persistentinfeetion24h，D15Persistentinfeetion48h.703mRNA的检ffiIJ结果OD28。值在1.8一2.0之间，1.2%琼脂糖凝胶电泳可观察到条带，表明抽提的RNA完整性较好(图3)。aeuteinfeetjonPersistentjnfeCtjon(h)02612244826122448

【参考文献】：
期刊论文
[1]沙眼衣原体感染Hela229细胞诱导SOCS-1,3的表达[J]. 魏秀青,程文,严杰,梅冰,霍治,余平.  中南大学学报(医学版). 2004(06)
[2]沙眼衣原体感染对HeLa细胞MHCⅠ、Ⅱ类分子表达的影响[J]. 余俊龙,唐发清,李立新,舒明星,余平.  中华微生物学和免疫学杂志. 2004(01)
[3]沙眼衣原体感染细胞中IFN-γ信号通路的初步研究[J]. 张小清,李建平,余平.  微生物学杂志. 2003(02)



本文编号：3496179