MacroH2A对B16黑色素瘤细胞凋亡和细胞周期进程影响的研究

发布时间：2023-06-01 19:43

　　目的：探索MacroH2A对体外培养B16黑色素瘤细胞的细胞周期及凋亡的影响,以及其对黑色素瘤细胞cyclinD1、cyclinD3、CDK4、 CDK6、CDK8表达的调控作用。探讨MacroH2A对黑色素瘤进展及对细胞周期影响的分子机制,更进一步了解恶性黑色素瘤的发生发展机制,并为恶性黑色素瘤的靶向治疗提供新的可能性方法。 方法：构建MacroH2A干扰表达载体质粒MacroH2A-shRNA质粒和超表达载体质粒MacroH2A-pcDNA3.1(+)质粒,将黑色素瘤细胞随机分为五组即空载质粒转染组,超表达质粒转染组,干扰表达质粒转染组,超表达后救援组,干扰表达后救援组。不同分组黑色素瘤细胞进行相应质粒转染后,采用Realtime-PCR,western blot和免疫荧光等检验方法分别于mRNA和蛋白质水平分析MacroH2A表达量以确定各组细胞成功转染及转染效率。用流式细胞术检测黑色素瘤细胞凋亡及和细胞所处不同细胞周期,并采用Realtime-PCR、western blot检测细胞周期调节的关键因素cyclinD1、 cyclinD3、CDK4、CDK6、CDK8相应mRNA...

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 引言
2 材料和方法
    2.1 细胞和主要试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 载体设计和细胞转染
        2.3.3 细胞分组及处理
        2.3.4 Realtime PCR
        2.3.5 Western blot
        2.3.6 免疫荧光检验
        2.3.7 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期
    2.4 数据统计分析
3 结果
    3.1 B16黑色素瘤细胞MacroH2A的超表达及翻译
    3.2 MacroH2A对黑色素瘤B16细胞进展的调节作用
    3.3 MacroH2A对细胞周期蛋白D和CDK的调节
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3826925