瑞士乳杆菌发酵液NS-FS干预皮肤光衰老的作用及机制研究

发布时间：2017-07-14 17:10

  本文关键词：瑞士乳杆菌发酵液NS-FS干预皮肤光衰老的作用及机制研究

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【摘要】：皮肤作为机体与外界接触的第一道屏障,也是人体最先衰老的器官。持续的紫外线照射可使皮肤细胞不断累积自由基和过氧化物质,同时削弱体内自身的抗氧化防御系统,从而引发皮肤的光老化、炎症,色素过量沉积甚至会导致黑色素瘤等皮肤癌症的形成。近些年来,乳酸菌的健康促进作用已经得到公认。其中,乳酸菌的抗氧化性在一些报道中也得到了实验证实。然而,有关乳酸菌或乳酸菌发酵产物干预紫外线引起的皮肤光衰老或光损伤的研究还非常少见。本研究主要探讨瑞士乳杆菌NS-8发酵液(NS-FS)干预皮肤光氧化作用,以及相关的分子机制。本课题主要分为体外和体内两个部分。在体外,通过ABST+和DPPH清除实验,我们发现NS-FS具有显著的的清除自由基的能力。并且在角质细胞HaCat中,NS-FS可以显著抑制Sin-1诱导生成的ROS,说明NS-FS具有较强的抗氧化能力。在体内,我们建立了紫外线UVB诱导的无毛小鼠SK.H-1模型,进一步验证NS-FS对于皮肤的抗氧化作用。结果证明NS-FS的局部给药可以有效缓解SKH-1无毛小鼠的皮肤光老化,如减少UVB引起的表皮增厚和跨膜失水量(TEWL),降低皮肤的脂质过氧化水平。另外,NS-FS改善了皮肤内抗过氧化酶(如过氧化氢酶CAT和谷胱甘肽过氧化酶GPx)的活性及蛋白表达水平。在进一步的机制研究中,我们发现NS-FS可以促进Nrf-2蛋白的活化,因此激发皮肤细胞的抗氧化活力,从而达到抵抗光老化的效果。通过本研究的结果,我们证实了瑞士乳杆菌发酵液对于皮肤光老化的干预作用及可能机制,为尝试开发出益生菌相关的美容护肤产品提供了前期的基础。
【关键词】：NS-8乳杆菌发酵液 紫外线 皮肤光衰老 抗氧化 Nrf-2
【学位授予单位】：杭州师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R758.1
【目录】：

• 致谢5-6
• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 缩略词表8-13
• 引言13-19
• 1.1 皮肤的光衰老13-16
• 1.1.1 紫外线引起皮肤光衰老13-14
• 1.1.2 皮肤光衰老机制14-15
• 1.1.3 益生菌用于治疗皮肤老化15-16
• 1.2 益生菌的抗氧化作用16-17
• 1.3 NS-8乳杆菌的发现与功能17-19
• 1.3.1 NS-8乳杆菌的发现17-18
• 1.3.2 益生菌减轻其他光衰老症状18-19
• NS-8乳酸菌发酵液(NS-FS)的抗氧化作用19-38
• 2 体外实验19-29
• 2.1 实验内容19-23
• 2.1.1 NS-FS的制备19-20
• 2.1.1.1 实验材料与试剂19
• 2.1.1.2 实验仪器19
• 2.1.1.3 实验方法19-20
• 2.1.2 B16F10细胞培养20-21
• 2.1.2.1 实验材料与试剂20
• 2.1.2.2 实验仪器20
• 2.1.2.3 培养方法20
• 2.1.2.4 胞传代20-21
• 2.1.2.4 细胞冻存21
• 2.1.2.6 细胞复苏21
• 2.1.3 NS-FS对B16F10细胞活力的影响21-22
• 2.1.3.1 实验材料与试剂21
• 2.1.3.2 实验仪器21
• 2.1.3.3 实验方法21-22
• 2.1.4 NS-FS清除细胞内ABTS~+自由基能力检测22
• 2.1.4.1 实验材料与试剂22
• 2.1.4.2 实验仪器22
• 2.1.4.3 实验方法22
• 2.1.5 NS-FS清除细胞内DPPH自由基能力检测22-23
• 2.1.5.1 实验材料与试剂22
• 2.1.5.2 实验仪器22-23
• 2.1.5.3 实验方法23
• 2.1.6 NS-FS清除细胞内ROS能力检测23
• 2.1.6.1 实验材料与试剂23
• 2.1.6.2 实验仪器23
• 2.1.6.3 实验方法23
• 2.2 实验结果23-27
• 2.2.1 制备NS-8乳杆菌发酵液(NS-FS)23-24
• 2.2.2 NS-FS对细胞活力影响不显著24-25
• 2.2.3 NS-FS显著清除细胞内自由基25-26
• 2.2.4 NS-FS显著清除细胞内ROS26-27
• 2.3 实验讨论27-29
• 3 体内实验29-38
• 3.1 实验内容29-32
• 3.1.1 无毛小鼠光衰老模型的建立29-30
• 3.1.1.1 实验材料与试剂29
• 3.1.1.2 实验仪器29
• 3.1.1.3 实验方法29-30
• 3.1.2 NS-8乳酸菌发酵液对抗氧化相关物质和相关酶活性的影响30-32
• 3.1.2.1 实验材料与试剂30
• 3.1.2.2 实验仪器30
• 3.1.2.3 实验方法30-32
• 3.2 实验结果32-37
• 3.2.1 SKH-1无毛小鼠皮肤光衰老模型建立完成32-35
• 3.2.2 小鼠皮肤内氧化反应相关物质含量变化35-37
• 3.3 实验讨论37-38
• NS-FS抗氧化机制的研究38-40
• 4.1 NS-FS对Nrf-2蛋白的影响38-40
• 4.1.1 实验内容38
• 4.1.1.1 实验材料和试剂38
• 4.1.1.2 实验仪器38
• 4.1.1.3 实验方法38
• 4.1.2 实验结果38-39
• 4.1.3 实验讨论39-40
• 总结与讨论40-42
• 参考文献42-43

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1 单闯;瑞士乳杆菌发酵液NS-FS干预皮肤光衰老的作用及机制研究[D];杭州师范大学;2016年

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本文编号：541923