Hr突变体转基因小鼠的构建和表型分析

发布时间：2017-08-23 02:09

  本文关键词：Hr突变体转基因小鼠的构建和表型分析

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【摘要】：无毛基因(Hr)定位于8p12,在染色体上跨越14 kb,包含19个外显子。无毛基因的自发突变能引起人和动物毛发脱落及相关毛发疾病的产生。为深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技术构建Hr表达载体,在该基因的3 427位引入点突变(G→A),通过显微注射建立转基因小鼠。采用PCR方法鉴定出阳性的转基因小鼠,确定首建鼠,通过与C57BL/6小鼠回交后互交数代建系。观察转基因小鼠毛发生长发育规律。结果表明,成功构建了pRP(Exp)-EF1Am Hairless mutantIRES/EGFP真核表达载体,通过与野生型小鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,第2代小鼠出生后14 d开始脱发,30 d左右脱落的毛发重新长出。取部分皮肤组织做石蜡切片,皮肤组织学观察发现,脱毛期无毛小鼠毛囊瓦解,真皮内形成大小不等的包囊,毛发重新生长时,真皮内见大量新生的毛囊。蛋白印迹实验表明,转基因小鼠脱发时HR蛋白表达量明显高于同龄阴性小鼠。本文成功建立稳定遗传的Hr突变的转基因小鼠品系,推测无毛基因突变引发转基因小鼠的脱发,为研究Hr基因的功能提供了良好的动物模型。
【作者单位】： 河南师范大学生命科学学院;郑州大学实验动物中心;
【关键词】： 无毛基因 转基因小鼠 表型
【基金】：国家自然科学基金(No.39970119,No.31372270)资助~~
【分类号】：R758.71;R-332
【正文快照】： 毛发为何生长?为何脱落?这个问题多年来一直困扰着人们[1]。毛发生长和脱落是一个高度复杂的过程,受到许多基因的调控[2]。尽管毛发基因调控的研究使人们对毛发的生长发育有了更为深刻的认识,但许多分子机制仍不清楚。因此,寻找影响毛发生长的因子,研究毛发脱落的原因仍是今后

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本文编号：722362