湿疹患者外周血中IL-32和OX40L的表达与临床相关性研究

发布时间：2017-09-18 11:00

  本文关键词：湿疹患者外周血中IL-32和OX40L的表达与临床相关性研究

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【摘要】：目的:湿疹是一种发生在表皮及真皮浅层的变态反应性疾病,皮损形态多样,以反复发作的红斑、丘疹,伴有瘙痒为主要特点,过敏体质者易发生。变应原致敏、皮肤屏障受损及Th细胞亚群分化失衡所导致的免疫功能异常,是导致湿疹发生发展的主要因素。白介素-32(Interleukin-22,IL-32)作为一种前炎症细胞因子,OX40L作为T细胞活化的共刺激分子配体,均对辅助性T细胞(T helper cells,Th)的分化和相关细胞因子、趋化因子的功能产生重要的影响。因此本实验的目的为:1.比较IL-32、OX40L m RNA在湿疹患者与正常人外周血中的表达差异;2.比较不同性别的湿疹患者IL-32、OX40L m RNA表达的差异;3.比较IL-32、OX40L m RNA在湿疹不同分期的患者外周血中的表达差异;4.观察IL-32、OX40L m RNA在湿疹患者外周血中表达的相关性,从而探讨这两个因子在湿疹发病中的相互作用;5.观察IL-32、OX40L m RNA在湿疹患者外周血中的表达水平与湿疹皮损面积及严重度指数(Eczema Area and Severity Index,EASI)、皮肤病生活质量指数(Dermatology Life Quality Index,DLQI)的相关性;6.应用白芍总苷治疗2周、4周后,观察湿疹患者外周血中IL-32、OX40L m RNA表达的变化,探讨白芍总苷(Total Glucosides of Peony,TGP)在湿疹治疗中的作用;7.观察IL-32、OX40L m RNA在湿疹患者外周血中的表达水平与相关实验室指标的相关性。方法:实验组为2014年2月至2015年11月就诊于天津市人民医院门诊就诊的湿疹患者60例。根据患者病史及临床表现分为急性期、亚急性期和慢性期三组,每组均为20例。诊断标准按照赵辨主编的《临床皮肤病学》。对照组成员来自在天津医科大学总医院同期体检的40例正常人。实验采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的方法,对60例湿疹患者和40例健康者外周血中IL-32m RNA和OX40L m RNA的表达水平进行检测,参照EASI和DLQI评分标准对60例湿疹患者进行评分。在统计软件SPSS17.0上对实验数据进行整理和分析,以P0.05作为差异有统计学意义的标准。结果:1.湿疹患者外周血中IL-32、OX40L m RNA的表达水平明显高于对照组(IL-32的"緾T值分别为:4.08±0.98,9.95±0.33;OX40L的"緾T值分别为:2.46±0.92,9.74±0.37),差异均有统计学意义。2.不同性别的湿疹患者外周血中IL-32、OX40L m RNA表达差异无统计学意义。3.急性期组、亚急性期组、慢性期患者外周血中IL-32 m RNA的表达量依次递减(IL-32的"緾T值分别为:2.91±0.42,4.35±0.63,4.98±0.19,差异有统计学意义);急性期组、亚急性期组、慢性期患者外周血中OX40L m RNA的表达量依次递减(OX40L的"緾T值分别为:1.39±0.29,2.71±0.49,3.28±0.58,差异有统计学意义)。4.经TGP治疗2周后,EASI评分和DLQI评分均降低,IL-32和OX40L m RNA表达水平较首诊时降低,且差异均有统计学意义(IL-32的"緾T值分别为:5.95±0.84,4.24±0.98;OX40L的"緾T值分别为:5.20±0.65,2.58±0.99;EASI评分分别为:8.66±3.01,13.02±2.32;DLQI评分分别为:12.06±3.63,16.84±3.80);经TGP治疗4周后,EASI评分和DLQI评分均降低,IL-32和OX40L m RNA表达水平较治疗2周时降低,且差异均有统计学意义(IL-32的"緾T值分别为:8.44±0.69,6.11±0.72;OX40L的"緾T值分别为:8.21±0.76,5.28±0.61;EASI评分分别为:5.73±2.15,8.79±3.20;DLQI评分分别为:7.68±3.12,12.01±3.70)。5.湿疹患者外周血中IL-32和OX40L m RNA的表达量呈正相关,r=0.80,差异有统计学意义。IL-32、OX40L m RNA的表达量与EASI评分呈正相关,r值分别为-0.74,-0.70,差异有统计学意义。6.IL-32、OX40L m RNA的表达量与嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)计数呈正相关,r值分别为-0.03,-0.02,差异有统计学意义。IL-32、OX40L m RNA的表达量与年龄、白细胞和淋巴细胞计数之间无明显相关性。结论:1.湿疹患者外周血中IL-32 m RNA和OX40L m RNA表达水平均明显高于正常对照组,且两个因子的表达水平与EASI评分之间呈正相关,说明IL-32和OX40L参与了湿疹的发生发展,可能在湿疹的发病过程中起到了一定的促进作用。2.IL-32与OX40L m RNA的表达量呈正相关性,说明两个因子可能在湿疹的发病过程中相互促进,可能通过TSLP相关传导通路来实现。3.经TGP治疗2周、4周后湿疹患者IL-32和OX40L m RNA的表达量均明显下调,EASI和DLQI评分均降低,说明TGP对湿疹有一定治疗作用。
【关键词】：湿疹 白介素-32 OX40L EASI评分 DLQI评分 白芍总苷
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R758.23
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 缩略语12-14
• 前言14-16
• 研究现状、成果14-15
• 研究目的、方法15-16
• 对象和方法16-28
• 1.1 病例来源16
• 1.2 对照组16
• 1.3 诊断标准16-17
• 1.4 排除标准17
• 1.5 疗效评估17-19
• 1.5.1 湿疹面积及严重指数评分法17-18
• 1.5.2 皮肤病生活质量指数评分18-19
• 1.6 主要试剂19-20
• 1.7 实验器材20-21
• 1.8 试剂的配置与存放21-22
• 1.9 实验器材的准备22
• 1.10 实验仪器22-23
• 1.11 实验方法和步骤23-27
• 1.11.1 样本处理23
• 1.11.2 超净台及实验器材消毒操作23
• 1.11.3 全血总RNA的提取23-24
• 1.11.4 总RNA的测定24
• 1.11.5 逆转录反应24-25
• 1.11.6 RT-PCR反应25-26
• 1.11.7 PCR产物凝胶电泳26-27
• 1.12 临床资料的采集27
• 1.13 实验室检查27
• 1.14 治疗方法27
• 1.15 统计学方法27-28
• 结果28-38
• 2.1 总RNA纯度检测28
• 2.2 总RNA完整性检测28
• 2.3 GAPDH、IL-32、OX40L扩增产物的鉴定28-32
• 2.4 湿疹患者EASI评分结果32-33
• 2.5 湿疹患者DLQI评分结果33-34
• 2.6 湿疹患者IL-32 和OX40L相对表达量及与部分指标相关性分析34-38
• 讨论38-51
• 3.1 Th细胞亚群的分化与湿疹的发病机制38-41
• 3.1.1 Th1/Th2免疫通路与湿疹38-39
• 3.1.2 Th17细胞与湿疹39
• 3.1.3 Th9细胞、Th22细胞与湿疹39-40
• 3.1.4 Treg与湿疹40-41
• 3.2 IL-32 与湿疹41-43
• 3.3 OX40L与湿疹43-47
• 3.4 IL-32 可能通过TSLP与OX40L互相作用47
• 3.5 白芍总苷及其对湿疹的治疗作用47-51
• 3.5.1 TGP可抑制DCs的成熟及其功能48
• 3.5.2 TGP可调节CD4+T细胞的功能48-51
• 结论51-52
• 参考文献52-61
• 发表论文和参加科研情况说明61-62
• 综述 OX40/OX40L共刺激分子在疾病中的研究进展62-80
• 综述参考文献71-80
• 致谢80-81
• 个人简历81

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本文编号：875111