研究扰流对内皮vWF分泌和血栓生成影响的动物模型之建立

发布时间：2024-02-02 18:46

　　本课题旨在建立一种研究扰流对血管内皮细胞活化和血栓生成影响的小鼠模型,并利用其探讨流体剪切力调控内皮细胞vWF分泌的机制。小鼠麻醉后暴露左侧颈总动脉及其分支,结扎颈外动脉后闭合创口。分别于术前和术后的第1、7 d,以超声多普勒无创检测左右两侧颈总动脉血流模式和血流速度;取血管以免疫荧光检测结扎前后血管内皮细胞粘附分子VCAM1、E-selectin、ICAM1的表达和血管内皮层vWF水平,可确认左侧颈总动脉处扰流的形成及内皮vWF分泌的增加。结扎术后以FeCl3孵育颈总动脉诱导内皮损伤,测血流速度发现流速为零,提示血栓形成。为实时监测血栓的形成,对颈静脉注射罗丹明6G标记血小板,荧光显微镜下可见血小板于FeCl₃孵育处聚集。研究结果发现结扎组的血管与未结扎组相比,其FeCl3诱导的血栓生成速度显著加快,可能机制是由于扰流型剪切力激活内皮SNARE(可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体)蛋白VAMP3与SNAP23,造成vWF分泌增加。这一假设在用平行板式流动腔剪切力加载系统对人脐静脉内皮细胞施加脉冲型剪切力(12±4 dynes/cm²

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本文编号：3892988