葡聚糖接枝透明质酸共聚物作为皮肤敷料的研究

发布时间：2017-04-02 23:15

  本文关键词：葡聚糖接枝透明质酸共聚物作为皮肤敷料的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：将葡聚糖降解后与透明质酸接枝反应合成葡聚糖接枝透明质酸共聚物，研究合成材料的生物相容性，探讨其作为皮肤敷料的应用前景。方法：甲酸降解β 1，3 D葡聚糖后，采用环氧氯丙烷活化葡聚糖，与透明质酸反应合成葡聚糖接枝透明质酸。比较机械搅拌与超声震荡的活化效率；采用FT-IR、13C-NMR对葡聚糖接枝透明质酸的化学结构进行表征；元素分析检测葡聚糖接枝透明质酸的接枝率；扫描电镜观察葡聚糖接枝透明质酸支架的形貌。将葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸与成纤维细胞（3T3）共培养，使用cck-8检测细胞毒性；将葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸涂膜于玻片上，接种成纤维细胞，在光学显微镜下观察细胞粘附情况；将材料与巨噬细胞进行共培养，提取细胞的TNF α、IL 1和IL-6的mRNA，经过PCR逆转录后，使用Real-time PCR检测三个因子相关DNA的含量。通过小鼠皮下降解试验分析材料的生物相容性和降解性能；小鼠皮肤创伤修复试验探讨材料促进皮肤伤口愈合的作用，使用HE染色从细胞水平进行分析。 结果：使用甲酸降解葡聚糖，得到纯度为99.55%的葡聚糖。采用FT-IR13、C-NMR、元素分析证实葡聚糖接枝透明质酸成功合成，且透明质酸的接枝率为76%。核磁分析得出透明质酸主要接枝在葡聚糖的C4和C6羟基上。通过SEM观察形貌得出葡聚糖接枝透明质酸支架表面有一定粗糙度，适合与生物组织粘附。通过细胞毒性实验结果表明材料在20mg/ml的浓度范围内没有细胞毒性。通过细胞粘附试验得出成纤维细胞可以在材料上正常增殖。小鼠皮下降解试验表明接枝透明质酸后其降解性能明显增加，且葡聚糖接枝透明质酸的降解速度随透明质酸增加而增大。通过小鼠创伤修复试验表明葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸都能够促进皮肤伤口愈合，葡聚糖接枝透明质酸更佳。这些表明葡聚糖接枝透明质酸作为皮肤敷料有较好的应用前景。
【关键词】：葡聚糖 透明质酸 生物活性 组织学分析 皮肤敷料
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 第一章 绪论7-15
• 1.1 葡聚糖的结构、生物医学功能7-10
• 1.1.1 葡聚糖的结构和理化性质7-8
• 1.1.2 葡聚糖的生物医学功能8-10
• 1.2 透明质酸的生物医学功能10-13
• 1.2.1 透明质酸的概述10-11
• 1.2.2 HA 作为药物缓释载体11-12
• 1.2.3 HA 在软骨组织工程中的应用12-13
• 1.2.4 HA 在皮肤组织工程中的应用13
• 1.3 本课题的研究意义、研究路线和创新点13-15
• 1.3.1 课题研究意义和研究内容13-14
• 1.3.2 本论文创新点14-15
• 第二章 葡聚糖接枝透明质酸的制备及其表征15-25
• 引言15
• 2.1 实验部分15-19
• 2.1.1 主要实验试剂与设备15-16
• 2.1.2 材料的制备16-17
• 2.1.3 材料理化性能的表征17-19
• 2.2 结果与讨论19-24
• 2.2.1 降解葡聚糖纯度的测定19-20
• 2.2.2 葡聚糖的活化20-21
• 2.2.3 红外光谱分析21
• 2.2.4 核磁共振分析21-23
• 2.2.5 元素分析23
• 2.2.6 海绵支架形貌23-24
• 2.4 本章小结24-25
• 第三章 葡聚糖接枝透明质酸的生物相容性25-34
• 引言25
• 3.1 实验部分25-27
• 3.1.1 主要实验试剂与设备25-26
• 3.1.2 细胞毒性实验26
• 3.1.3 细胞粘附试验26-27
• 3.2 葡聚糖及其衍生物对巨噬细胞的刺激作用27-29
• 3.2.1 Realtime-PCR 实验27-29
• 3.3 结果与讨论29-33
• 3.3.1 细胞毒性29-30
• 3.3.2 细胞粘附30-31
• 3.3.3 免疫活性31-33
• 3.4 本章小结33-34
• 第四章 葡聚糖接枝透明质酸的降解及其作为皮肤敷料34-47
• 引言34
• 4.1 实验部分34-37
• 4.1.1 主要实验试剂与设备34-35
• 4.1.2 小鼠皮下降解实验35-37
• 4.1.3 小鼠皮肤创伤修复实验37
• 4.2 结果与讨论37-46
• 4.2.1 皮下降解大体观察37-39
• 4.2.2 皮下降解组织切片观察39-41
• 4.2.3 皮肤创伤修复大体观察41-44
• 4.2.4 皮肤创伤组织切片观察44-46
• 4.3 本章小结46-47
• 全文总结47-48
• 参考文献48-56
• 在学期间发表论文清单56-57
• 致谢57

【参考文献】

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 黄建艳;琼脂糖接枝透明质酸共聚物作为多肽载体的研究[D];暨南大学;2009年

2 陈强;类固醇激素受体辅激活子3（SRC-3）在小鼠腹膜炎中的作用及抗炎药物的筛选[D];厦门大学;2009年

  本文关键词：葡聚糖接枝透明质酸共聚物作为皮肤敷料的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：283323