混合信号诱导的大鼠骨髓干细胞复合支架成牙的体内研究
本文关键词：混合信号诱导的大鼠骨髓干细胞复合支架成牙的体内研究，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的:探究经碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨形态发生蛋白(BMP-2)混合信号诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)与明胶海绵或聚乙烯醇-双相陶瓷骨(PVA-DCCP)三维(3D)打印支架材料复合在体内环境中的成牙潜能。方法:将取自SD大鼠的BMSCs与牙胚细胞在b FGF和BMP-2混合信号诱导的微环境中共培养后分别接种于明胶海绵及3D打印的PVA/DCCP复合支架材料上,然后回植入同种异体SD大鼠肾被膜下。受试SD大鼠随机分为五组:A组-单纯信号(牙胚细胞)诱导BMSCs/明胶海绵组;B组-混合信号(牙胚细胞、bFGF及BMP-2)诱导BMSCs/明胶海绵组;C组-单纯信号诱导BMSCs/PVA-DCCP三维打印支架组;D组-混合信号诱导BMSCs/PVA-DCCP三维打印支架组;E组-完整牙胚组织。在回植后的第1、3、7、14、28天采集回植物样本,用实时定量PCR(RT-PCR)检测成牙基因成釉蛋白(AMBN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)、?型胶原蛋白(Collagen-?)以及同源异型盒基因1(DLX1)的mRNA水平,用苏木精-伊红(HE)染色法观测各组样本的组织学改变。结果:RT-PCR定量分析得,除Collagen-?的表达量随培养时间的延长而逐渐增加外,AMBN、DMP1、DLX1三个基因均呈逐渐下降趋势,各基因在不同时间点的表达量与完整牙胚(E组)均存在统计学差异(P㩳0.05)。上述四个成牙相关基因的mRNA相对表达水平在不同支架材料组之间差异具有显著性(P㩳0.001);不同成牙信号组之间对各个基因有影响,但不如支架材料明显。HE染色可见,牙胚组织(E组)植入肾被膜28天后形成大鼠正常磨牙样形态结构;经牙胚细胞、bFGF及BMP-2混合信号诱导的BMSCs种植于明胶海绵回植后可形成不完整的类牙样结构(B组),但与正常牙组织形态有一定差别;A、C、D组未见明显的类牙样矿化组织形成,但在PVA-DCCP三维打印支架组(C、D)组支架材料吸收不完全。结论:在体内模拟环境下,混合信号较单纯信号诱导的大鼠BMSCs与支架材料复合后能够更快地增殖、分化并强化表达相应的成牙基因,促进组织工程牙胚的形成。优选支架材料并构建合适的组织工程牙模型对实现非牙胚源性细胞向牙源性细胞方向的转化同样具有重要意义。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 3D打印 聚乙烯醇-双相陶瓷骨 组织工程牙
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.1
【目录】：
- 中英文缩略词对照表5-7
- 摘要7-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-12
- 研究内容与方法12-18
- 1. 实验仪器及材料12
- 1.1 主要试剂与仪器,见表 112
- 1.2 实验材料12
- 2. 实验内容及方法12-16
- 2.1 实验分组12-13
- 2.2 实验方法13-16
- 3. 统计学处理16-17
- 4. 技术路线图17-18
- 结果18-33
- 讨论33-38
- 小结38-39
- 致谢39-40
- 参考文献40-42
- 综述42-50
- 参考文献46-50
- 攻读硕士学位期间发表的学位论文50-51
- 导师评阅表51
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本文编号：327053
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