脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合

发布时间：2024-03-10 18:33

　　背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞能否促进兔腱-骨愈合。方法:①体外分离培养人羊膜间充质干细胞,经过传代培养后观察细胞的形态;②体外构建Scleraxis慢病毒然后以最适感染复数转染第3代人羊膜间充质干细胞,q-PCR检测其转染效率;③用酶消化法制备脱细胞羊膜支架,然后体外将转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞接种到脱细胞羊膜支架上面,鬼笔环肽染色观察细胞在支架上的生长情况;④将脱细胞羊膜支架复合转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞包裹新西兰大白兔跟腱,然后移植到骨隧道内,观察其对腱-骨愈合的影响。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈贴壁生长,细胞生长状态良好;②Scleraxis慢病毒转染后96 h表达稳定的绿色荧光,Slclerxis的m RNA表达水平明显提高,说明转染成功;③脱细胞羊膜支架的上皮细胞基本消失,证明脱细胞比较彻底,同时其基底...

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图1脱细胞羊膜支架的制备过程

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图2倒置相差显微镜下观察人羊膜间充质干细胞的形态(×40)

图1脱细胞羊膜支架的制备过程图4实时荧光定量PCR检测Scleraxis的mRNA表达水平

图4实时荧光定量PCR检测Scleraxis的mRNA表达水平

图2倒置相差显微镜下观察人羊膜间充质干细胞的形态(×40)图3Scleraxis慢病毒感染人羊膜间充质干细胞

图3Scleraxis慢病毒感染人羊膜间充质干细胞

图4实时荧光定量PCR检测Scleraxis的mRNA表达水平图5脱细胞羊膜支架的性能

本文编号：3925193