LIPUS作用下多孔钛合金支架材料内成骨诱导后骨髓间充质干细胞和MC3T3-E1细胞生物学行为的比较研究

发布时间：2024-03-16 10:17

　　目的:低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)因为其无创性,较安全,效果佳,操作简单以及较短的治疗周期,是研究领域公认的可促进骨愈合的物理治疗措施。LIPUS是一种强度介于30-100mW/cm2的脉冲式超声波,它能将声波转化为力学信号,并以低强度压力波的形式传递到组织中,上调细胞功能和增强组织再生。LIPUS还可以促进局部缺损部位的血液循环和血管的形成及缺损部位钙盐沉积和骨组织的改建。LIPUS已经在国内外临床上用于骨折、骨愈合不良和骨不连的治疗。近年来,国内外学者以及本课题组研究的主要目的是将LIPUS与骨支架材料结合应用于大面积骨缺损修复,为超临界骨缺损的修复治疗提供一种新的手段,而关于在“三维钛合金支架材料+LIPUS”修复骨缺损机制的研究中,首选的细胞模型尚未明确。因此在本研究中,比较LIPUS对多孔Ti6A14V材料(titanium-6aluminum-4vanadi um,Ti6A14V)内成骨诱导后骨髓间充质干细胞(osteogenic medium cultured bone marrow mesenchymal...

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图1体外细胞实验多孔Ti6Al4V材料，500μm：×35用丙酮，75％的酒精和双蒸水清洗样品材料3次，超声震荡处理15min，然后

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图2体外细胞实验超声加载装置图[19]

中国医科大学硕士学位论文7图2体外细胞实验超声加载装置图[19]2.2.8MTT法检测细胞增殖活性将4组共培养模型（同1.2.6）于1d，3d，5d，7d，弃去培养基，PBS漂洗，每孔加入5mg/mlMTT200μl和新鲜培养基800μl，在培养箱中孵育4h，吸出孔内孵育液，每孔....

图3不同时间点原代BMSCs形态观察（×100）

中国医科大学硕士学位论文3结果3.1小鼠BMSCs培养小鼠BMSCs接种3d后，镜下可见细胞贴壁良好、集落式生长，呈长梭形或多角形，见图2A。6d后，大部分细胞贴壁延伸，形状逐渐变为长梭形，见图2B。8d后细胞间广泛接触，见图2C。10d后细胞密度可达80%左右，细胞结构清晰，放....

图4BMSCs成骨诱导不同时间染色结果

中国医科大学硕士学位论文伸出伪足与细胞相连。当细胞密度逐渐增大，细胞开始重叠生长，细胞结构不再明显，钙离子在细胞表面以钙盐方式沉淀下来，即“钙结节”。成骨诱导7d，14d时采用氮蓝四唑/四唑硝基蓝（NBT/BCIP）染色法进行ALP染色，细胞内分泌的ALP颗粒被染成蓝色，见图4A....

本文编号：3929510