松质骨/水凝胶支架构建类骨软骨复合物
发布时间：2024-04-27 22:06
软骨组织结构简单,无血管神经长入,因此自身修复能力有限。传统的软骨缺损治疗方法各有局限性且不能完全恢复软骨组织的功能性,因此,利用组织工程方法构建骨软骨仿生组织复合物是未来解决大面积骨软骨缺损的最佳方法之一。本实验采用生物相容性强、与人体骨组织结构及性能相似的猪源骨松质脱脂、脱钙、脱蛋白后作为骨部分仿生支架,将壳聚糖明胶混合冻干并交联后构建壳聚糖-明胶水凝胶支架作为软骨部分仿生支架。在构建的水凝胶/松质骨支架上分别接种骨细胞软骨细胞方向诱导分化后的脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells, ADSCs)后,构建双层骨软骨复合物并检测其用于骨软骨修复中的可行性。 首先,制备骨松质支架,检测其孔径分布、孔隙率,扫描电镜观察其表面形貌并利用红外检测其化学组成。扫描电镜观察发现骨松质支架表面有大量纳米级突起,骨松质支架内孔道连通,支架的平均孔径为410±59μm,孔隙率为70.64±1.71%。通过红外检测发现,骨松质支架内含有羟基磷灰石与蛋白质等有机物质。制备不同浓度的壳聚糖/明胶水凝胶支架并检测不同浓度下支架的孔隙率、溶胀率及降解率,选择综合性能最优的浓度用于制备本...
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 关节骨软骨结构
1.1.1 软骨结构
1.1.2 临床软骨缺损的修复
1.1.3 组织工程方法修复骨软骨缺损
1.2 骨软骨复合支架
1.2.1 骨软骨复合支架种子细胞
1.2.2 骨软骨复合支架材料
1.2.3 骨软骨复合支架构建
1.2.4 骨软骨复合支架的应用前景
1.3 选题依据及研究内容
2 骨及软骨支架的制备及性能检测
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 实验药品
2.1.2 实验仪器
2.1.3 溶液配制
2.2 骨松质支架制备方法
2.3 骨松质支架的检测
2.3.1 骨松质形态观察及孔隙率
2.3.2 扫描电镜观察及红外检测
2.4 壳聚糖/明胶水凝胶的制备
2.5 壳聚糖/明胶水凝胶的性能检测
2.5.1 水凝胶孔隙率及溶胀率的测定
2.5.2 水凝胶降解率的测定
2.5.3 扫描电镜观察及红外检测
2.5.4 数据分析
2.6 结果与讨论
2.6.1 骨松质的孔隙率及孔径
2.6.2 骨松质形貌与化学组成分析
2.6.3 水凝胶的孔隙率、溶胀率及降解率
2.6.4 水凝胶的孔径与微观形貌
2.6.5 水凝胶的化学组成分析
2.7 小结
3 脂肪干细胞的分离和培养
3.1 实验材料
3.1.1 实验药品与试剂
3.1.2 实验仪器与装置
3.1.3 实验所需溶液的配制
3.2 实验方法
3.2.1 脂肪干细胞的体外获得及原代、继代培养
3.2.2 脂肪干细胞成脂肪诱导
3.2.3 脂肪干细胞成软骨诱导
3.2.4 脂肪干细胞成骨诱导
3.3 结果与讨论
3.3.1 不同培养时间脂肪干细胞的形态
3.3.2 脂肪干细胞的脂肪分化能力
3.3.3 脂肪干细胞的骨向分化能力
3.3.4 脂肪干细胞的软骨分化能力
3.4 小结
4 脂肪干细胞与支架的复合培养
4.1 实验材料
4.2 实验方法
4.2.1 骨部分仿生组织的体外培养
4.2.2 水凝胶软骨仿生组织的体外培养
4.2.3 双层支架的复合培养及检测
4.2.4 扫描电镜观察细胞及胞外基质分泌物
4.2.5 数据分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 骨松质支架内细胞的生长增殖情况
4.3.2 骨松质支架内细胞的骨向分化能力
4.3.3 骨松质支架上细胞及分泌物
4.3.4 水凝胶内细胞的生长增殖情况
4.3.5 水凝胶支架上的细胞及胞外分泌物
4.3.6 细胞生长增殖活性定量分析
4.4 小结
结论
参考文献
附录A 英文缩略词
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
本文编号：3965775
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 关节骨软骨结构
1.1.1 软骨结构
1.1.2 临床软骨缺损的修复
1.1.3 组织工程方法修复骨软骨缺损
1.2 骨软骨复合支架
1.2.1 骨软骨复合支架种子细胞
1.2.2 骨软骨复合支架材料
1.2.3 骨软骨复合支架构建
1.2.4 骨软骨复合支架的应用前景
1.3 选题依据及研究内容
2 骨及软骨支架的制备及性能检测
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 实验药品
2.1.2 实验仪器
2.1.3 溶液配制
2.2 骨松质支架制备方法
2.3 骨松质支架的检测
2.3.1 骨松质形态观察及孔隙率
2.3.2 扫描电镜观察及红外检测
2.4 壳聚糖/明胶水凝胶的制备
2.5 壳聚糖/明胶水凝胶的性能检测
2.5.1 水凝胶孔隙率及溶胀率的测定
2.5.2 水凝胶降解率的测定
2.5.3 扫描电镜观察及红外检测
2.5.4 数据分析
2.6 结果与讨论
2.6.1 骨松质的孔隙率及孔径
2.6.2 骨松质形貌与化学组成分析
2.6.3 水凝胶的孔隙率、溶胀率及降解率
2.6.4 水凝胶的孔径与微观形貌
2.6.5 水凝胶的化学组成分析
2.7 小结
3 脂肪干细胞的分离和培养
3.1 实验材料
3.1.1 实验药品与试剂
3.1.2 实验仪器与装置
3.1.3 实验所需溶液的配制
3.2 实验方法
3.2.1 脂肪干细胞的体外获得及原代、继代培养
3.2.2 脂肪干细胞成脂肪诱导
3.2.3 脂肪干细胞成软骨诱导
3.2.4 脂肪干细胞成骨诱导
3.3 结果与讨论
3.3.1 不同培养时间脂肪干细胞的形态
3.3.2 脂肪干细胞的脂肪分化能力
3.3.3 脂肪干细胞的骨向分化能力
3.3.4 脂肪干细胞的软骨分化能力
3.4 小结
4 脂肪干细胞与支架的复合培养
4.1 实验材料
4.2 实验方法
4.2.1 骨部分仿生组织的体外培养
4.2.2 水凝胶软骨仿生组织的体外培养
4.2.3 双层支架的复合培养及检测
4.2.4 扫描电镜观察细胞及胞外基质分泌物
4.2.5 数据分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 骨松质支架内细胞的生长增殖情况
4.3.2 骨松质支架内细胞的骨向分化能力
4.3.3 骨松质支架上细胞及分泌物
4.3.4 水凝胶内细胞的生长增殖情况
4.3.5 水凝胶支架上的细胞及胞外分泌物
4.3.6 细胞生长增殖活性定量分析
4.4 小结
结论
参考文献
附录A 英文缩略词
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
本文编号：3965775
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