微流控技术制备的骨髓间充质干细胞海藻酸微球/磷酸钙骨水泥复合物的初步探索

发布时间：2024-05-09 06:09

　　目的:研究微流控技术制备载骨髓间充质干细(bone mesenchymal stem cell,BMSC)海藻酸微球的技术方法;探索载BMSC海藻酸微球与磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)复合的可行性,为此类骨修复材料发展策略提供新的依据。方法:1.利用微流控技术制备荧光海藻酸微球及载BMSC海藻酸微球,观察其形态并探索其包裹的BMSC的存活、增殖情况和成骨分化潜能全骨髓差速贴壁法分离培养、纯化SD大鼠BMSC;制作微流芯片,通过微流控技术制备荧光海藻酸微球及载BMSC海藻酸微球。显微镜下观察荧光海藻酸微球的形态、分布情况;设对照组(BMSC组)、多细胞微球组(M-BMSC-Gel组)、单细胞微球组(S-BMSC-Gel组),利用光学显微镜观察微球的形态,测量微球的最大直径和面积;利用激光共聚焦与倒置荧光显微镜观察微球中BMSC生长状况,通过Live/Dead染色观察BMSC的存活情况;利用CCK-8检测BMSC的代谢活性,及通过DAPI细胞核染色观察微球中BMSC的增殖情况;通过ALP活性检测、茜素红染色、SEM观察及能谱分析、RT-PCR检测海...

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1海藻酸微球在水介质中荧光图像（100×）

△△Ct=[实验组(Ct目的-Ct内参)],2-△△Ct表示实验组相对于对照组目的基因表达SS16.0统计软件进行数据分析，计量资料用以采用t检验，三组或三组以上采用方差分析，者Tamhane法，检验水准α=0.05。三、实验结果制备荧光海藻酸微球的形貌观察控....

图1-2载BMSC海藻酸微球光镜图

技术制备的载BMSC的海藻酸微球的形态、大小微流控技术制备的BMSC多细胞海藻酸微球（M-BMSC-Gel组单细胞海藻酸微球（S-BMSC-Gel组），在光学显微镜下观察其微球最大直径和微球面积，结果显示：微流控技术制备的载BM微球，大小均匀，尺寸可控。BMSC....

图1-3载BMSC的海藻酸微球面积和最大直径分布图

.微球包裹的BMSC的Live/Dead染色对BMSC组、BMSC多细胞微球组（M-BMSC-Gel组）和BMS微球组（S-BMSC-Gel组）三组进行了Live/Dead染色，结果显示，在1dBMSC贴壁呈铺展状态，被染成绿色荧光，4dBMSC....

图1-4三组BMSC的Live/Dead染色图（100×）

控技术制备的骨髓间充质干细胞海藻酸微球/磷酸钙骨水泥复合物的初步探索2019届硕士学位论文BMSC组M-BMSC-Gel组S-BMSC-Gel组

本文编号：3968428