桑蚕丝低温成形组织工程支架预研与PLGA支架的动物实验研究

发布时间：2017-06-27 05:12

  本文关键词：桑蚕丝低温成形组织工程支架预研与PLGA支架的动物实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着社会的发展、人们生活水平的提高，人类对损伤、疾病的治疗要求也越来越高，传统的修复方法有自体组织移植术和同种异体器官移植法，虽然能够取得一定的疗效，但会导致很多并发症及附加损伤。由此可见，应用传统的治疗方法已经难以满足需求，必须寻找新的治疗途径。"组织工程学"这一概念，是RobertLanger和Joseph P Vacanti在80年代的时候首次提出的，为千千万万需要器官移植以及组织修复的患者带来了曙光。 组织工程学是预先在体外构建一个有生物活性的种植体，培养一段时间后，移植入体内，从而修复缺损的组织，最后替代组织、器官的一部分或全部功能，或者不移植入体内，在体外作为替代组织、器官部分功能的装置，以延长生命活动，提高生活的质量。组织工程学的研究内容主要有三个方面：种子细胞、生物支架材料及生长因子。其中，支架是细胞生长的场所，，细胞在其上生长、增殖、分化，并最终长成一个器官或组织，因此，生物支架材料的研究是组织工程学研究的一个非常重要的方面。 本文包括两部分内容，即桑蚕丝低温成形组织工程支架的研究和修复脊髓损伤的动物实验，其中，第一章、第二章、第三章、第四章阐述了桑蚕丝低温成形组织工程支架的研究的有关内容，第五章阐述了修复脊髓损伤的动物实验的有关内容。 桑蚕丝是由桑蚕体内的绢丝腺合成、分泌的纤维蛋白，是一种天然的高分子生物材料，具有良好的生物相容性和力学性能，以及较慢的降解速度，在医疗领域已经获得了广泛的应用。然而，低温沉积制造工艺是一种将材料的挤压/喷射过程和热致相分离过程集成起来的一种快速成型技术，主要是在低温室中形成所需模形，然后再利用热致相分离法将材料和溶剂相分离。此方法成形的支架具有较高的孔隙率；具有精确的三维结构；可以很好的保持材料的生物性能。综上，本文考虑采用低温沉积制造工艺将桑蚕丝成形为三维的支架，并进行了相关内容的研究，希望将二者的优势结合，扩大桑蚕丝的应用领域。 组织工程的迅速兴起给脊髓损伤后的神经功能恢复带来了新的希望，而支架的三维结构成为用组织工程方法治疗脊髓损伤的关键因素。本文采用PLGA作为生物支架材料，通过低温快速成形工艺制备了脊髓支架，对支架的各项性能进行表征后，结果表明支架的孔隙率、亲水性、降解性等满足组织工程脊髓支架的要求。然后采用雪旺细胞进行了支架的体外细胞培养实验，观察显示，雪旺细胞在PLGA支架上生长、增殖情况良好，实验表明支架的细胞相容性良好，适合雪旺细胞粘附和生长。最后采用大鼠进行了支架修复脊髓损伤的动物实验，即先将大鼠的脊髓损伤，然后将粘附有雪旺细胞的PLGA支架移植到大鼠的脊髓损伤部位，正常饲养一个月，观察大鼠的恢复情况，每周进行一次BBB评分。实验结果表明，在实验后的第1周，脊髓损伤后的大鼠均有不同程度的截瘫，但是从第2周开始，大鼠的BBB评分开始慢慢的恢复。
【关键词】：组织工程 桑蚕丝 低温沉积制造 支架 脊髓损伤
【学位授予单位】：杭州电子科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 目录9-12
• 第1章 绪论12-23
• 1.1 组织工程与组织工程支架12-14
• 1.1.1 组织工程概述12-13
• 1.1.2 组织工程支架的作用13-14
• 1.2 制备支架的方法14-17
• 1.2.1 制备支架的传统方法14-16
• 1.2.2 快速成形支架的技术16-17
• 1.3 低温沉积成形技术（LDM）17-19
• 1.4 本文的意义和主要研究内容19-23
• 1.4.1 本文的意义19-21
• 1.4.2 本文的主要研究内容21-23
• 第2章 桑蚕丝简介23-28
• 2.1 桑蚕丝的结构与组成23
• 2.2 桑蚕丝的性能23-24
• 2.2.1 桑蚕丝的生物相容性23
• 2.2.2 桑蚕丝的生物力学性能23-24
• 2.2.3 桑蚕丝的降解性24
• 2.3 细胞对桑蚕丝的反应24-26
• 2.4 桑蚕丝用作组织工程支架材料26-28
• 第3章 桑蚕丝素溶液的制备28-33
• 3.1 实验材料28
• 3.2 实验器材28
• 3.3 实验方法28-29
• 3.3.1 脱胶28
• 3.3.2 溶解工艺28
• 3.3.3 溶解方法28-29
• 3.4 结果和讨论29-33
• 3.4.1 磷酸溶解桑蚕丝素纤维29-30
• 3.4.2 溴化锂溶解桑蚕丝素纤维30
• 3.4.3 硫氰酸锂溶解桑蚕丝素纤维30-31
• 3.4.4 氢氧化钠溶解桑蚕丝素纤维31
• 3.4.5 硝酸钙溶解桑蚕丝素纤维31-32
• 3.4.6 氯化钙溶解桑蚕丝素纤维32-33
• 第4章 低温成形桑蚕丝组织工程支架33-46
• 4.1 低温沉积工艺过程33-39
• 4.2 低温成形桑蚕丝组织工程支架39-43
• 4.2.1 桑蚕丝和壳聚糖的组织工程支架39-41
• 4.2.2 桑蚕丝和 PLGA 的组织工程支架41-43
• 4.3 支架的性能表征43-46
• 4.3.1 支架的降解性能表征43-44
• 4.3.2 支架的孔隙率表征44-46
• 第5章 组织工程支架修复脊髓损伤的动物实验46-61
• 5.1 实验背景46-48
• 5.1.1 支架材料聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）46-47
• 5.1.2 PLGA 支架的制备47-48
• 5.2 支架性能表征48-50
• 5.2.1 支架的孔隙率测定48
• 5.2.2 支架的力学性能测定48-49
• 5.2.3 支架的降解速率测定49-50
• 5.3 大鼠雪旺细胞的体外培养和纯化50-53
• 5.3.1 雪旺细胞简介50
• 5.3.2 值块法和酶消化法相结合50-51
• 5.3.3 结论51
• 5.3.4 实验材料和方法51-52
• 5.3.5 结果和分析52-53
• 5.4 PLGA 支架的体外细胞培养53-55
• 5.4.1 实验材料和方法53
• 5.4.2 结果53-55
• 5.4.3 讨论55
• 5.5 支架修复脊髓损伤的动物实验55-61
• 5.5.1 实验材料和方法55-56
• 5.5.2 修复效果评估56-59
• 5.5.3 结果及结论59-61
• 第6章 总结与展望61-63
• 致谢63-64
• 参考文献64-69
• 附录69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张文怡,李曦光,张健;雪旺细胞复合蚕丝支架体外培养的实验研究[J];北京口腔医学;2005年04期

2 田杰谟,李信勇,张勇,王晓燕;浸浆法制备生物多孔陶瓷[J];功能材料;2002年06期

3 岳海源;汪玉良;孙振刚;任冬青;;脊髓损伤修复研究进展[J];国际骨科学杂志;2010年02期

4 洪楷;温凤金;翁惠兰;吴利标;;雪旺细胞体外培养改良新方法的实验研究[J];国际检验医学杂志;2009年01期

5 赵林;谢艳招;陈文明;刘标;吴松辉;;基于蚕丝蛋白的医用仿生材料[J];海峡药学;2010年12期

6 谢丽娜;刘秀华;;前脂肪细胞与蚕丝支架体外复合培养的实验研究[J];淮海医药;2007年01期

7 杨照;申少波;刘文晶;徐丽莎;赵倩;韩英;尹芳;周新民;;蚕丝蛋白和明胶复合组织工程材料的组织相容性研究[J];华南国防医学杂志;2011年01期

8 索海瑞;岳秀艳;史廷春;姜睿智;邱建辉;蔡建辉;王秋君;李艳蕾;;组织工程支架的低温沉积制造工艺参数研究[J];机电工程;2009年03期

9 向虎,费小琛,卢清萍,颜永年,熊卓,林峰,尹曦;骨组织工程材料PLGA/TCP的温度黏度性能[J];清华大学学报(自然科学版);2004年08期

10 金乐;熊卓;刘利;颜永年;张人佶;;基于活塞挤出的组织工程支架低温沉积制造工艺[J];清华大学学报(自然科学版);2009年05期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 张玉朵;股骨三维重建与人工髋关节生物力学研究[D];天津大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 陈美花;低温成形组织工程支架修复脊髓损伤的实验研究[D];杭州电子科技大学;2012年

  本文关键词：桑蚕丝低温成形组织工程支架预研与PLGA支架的动物实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：488671