hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2表型极化缓解脊髓损伤的实验研究

发布时间：2024-02-24 10:23

　　目的:创伤性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是中枢神经系统难治性外伤疾病,具有较高的致残率和病死率,因无法解决受损脊髓组织神经电信号通路连接等问题,目前没有很好的治疗方案。目前干细胞疗法在脊髓损伤修复中取得了一定疗效,其促进组织损伤修复和再生在很大程度上依赖其旁分泌实现,而外泌体(exosomes)是干细胞旁分泌的主要活性成分,故本课题旨在研究人脐带间充质干细胞来源外泌体(exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC-Ex)在大鼠脊髓撞击损伤修复中的作用,并探讨其相关机制。方法:构建原位注射hucMSC-Ex修复SD大鼠脊髓撞击损伤模型,进行术后为期6 w的BBB score,结合对损伤部位脊髓组织大体观的观察、脊髓组织HE染色和TUNEL染色情况判断hucMSC-Ex对SCI的修复作用。体内采用western-blot、免疫组化、免疫荧光染色和qRT-PCR技术检测hucMSC-Ex对脊髓组织中小胶质细胞极化态的影响。体外培养小胶质细胞,使用LPS(Lipopol...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1技术路线1：原位注射hucMSC-Ex修复大鼠脊髓撞击损伤模型的构建

hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2表型极化缓解脊髓损伤的实验研究8第二章研究目的、实验方案及意义2.1研究目的（1）建立原位注射hucMSC-Ex修复脊髓撞击损伤的模型，明确hucMSC-Ex极化小胶质细胞促进脊髓损伤修复的作用。（2）探讨hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M....

图2.2技术路线2：hucMSC-Ex在小胶质细胞表型转化中的作用（）体内实验

江苏大学硕士学位论文9位左右两侧各三个深位及背侧损伤表面共计7个位点注射hucMSC-Ex，PBS组即将hucMSC-Ex换成相同体积的PBS。利用小动物活体成像技术观察Dil-hucMSC-Ex在体内的分布，通过对实验组动物进行为期6w的后肢运动功能评分、不同时间点组织大体观、....

图2.3技术路线3：hucMSC-Ex促进小胶质细胞极化对神经系统其它细胞的影响

hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2表型极化缓解脊髓损伤的实验研究10胞。通过形态观察、蛋白标志物检测和免疫荧光染色对其进行鉴定。②LPS极化原代小胶质细胞模型：用1μG/mLLPS和200μG/mLhucMSC-Ex处理原代小胶质细胞，分3组：①PBS组；②LPS组；③LPS....

图2.4技术路线4：hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2极化的机制研究（1）根据HFL-Ex和hucMSC-ExmiRNA表达差异谱测序结果挑选hucMSC-Ex中高表达的miRNA，并采用qRT-PCR技术检测HFL-Ex和hucMSC-Ex中miRNA中的

江苏大学硕士学位论文11（3）对内皮细胞HUVEC的影响：小胶质细胞上清液处理内皮细胞检测其凋亡相关指标，观察小管形成和内皮细胞迁移情况。见技术路线3。2.2.4hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2极化的机制研究图2.4技术路线4：hucMSC-Ex促进小胶质细胞向M2极化的机....

本文编号：3908852