积雪草酸缓解关节软骨细胞的肥大化和纤维化分化的作用机制研究

发布时间：2024-02-25 19:47

　　骨关节炎(osteoarthritis,OA)是膝关节疾病中一种最常见的疾病类型,其特征是关节软骨的逐渐退化。据统计,超过80%的中老年人患有不同程度的骨关节炎,因缺乏有效的临床干预手段,严重降低了人们的生活质量,加重了社会的经济负担。目前OA的具体发病机制还不明确,有证据表明,骨关节炎与软骨病理密切相关,其中包括软骨细胞的肥大分化和纤维化分化。在OA进程中,透明软骨向肥大软骨和纤维化软骨细胞分化,诱导软骨基质降解、软骨内血管入侵和骨刺形成。另外,关节软骨细胞的去分化通常发生在体外培养和扩增的过程中,其特点是Ⅱ型胶原(collage typeⅡ,COL-Ⅱ)的丢失和Ⅰ型胶原(collage type Ⅰ,COL-Ⅰ)的增加。当软骨细胞作为种子细胞用于软骨组织工程时,表型不稳定和容易获得成纤维细胞样表型严重影响软骨修复的结果。综上所述,如何抑制软骨细胞肥大和软骨细胞纤维化分化是OA治疗和软骨组织工程中备受关注的问题。积雪草酸(Asiatic acid,AA)是一种从积雪草中分离得到的五环三萜类化合物,具有多种药理作用,包括抗氧化、抗炎、保肝等作用。最近的研究表明,AA可抑制心肌肥厚和肝纤...

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图3.2.1人OA软骨细胞的提取过程

西南大学硕士学位论文10吸取消化后的软骨碎屑并且置于50mL离心管中，在400g条件下离心20min,使得细胞充分沉淀在试管底部。随后，将离心好的试管取出，小心弃去上层清液，用1mL含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基重悬细胞沉淀，轻轻吹打使细胞分散均匀；然后用微量移液枪吸....

图4.1.1AA对人OA软骨细胞活力的影响

4.1.1不同浓度AA处理人OA软骨细胞后的死活染色和CCK-8结果不同浓度AA(0、5、10和20μM)AA处理人OA软骨细胞24h后，分别采用CCK-8试剂盒和死活染色试剂盒检测细胞活性。AA的化学结构式如图4.1A所示。图....

图4.2.1未加药物处理(control)和AA处理人OA软骨细胞后(AA)两组Runx2、COL10a1和MMP-13mRNAt**P<0.01ns:

西南大学硕士学位论文164.2AA对人OA软骨细胞肥大化表型的影响4.2.1AA处理人OA软骨细胞后肥大化标记物COL-X、MMP-13和Runx2的qRT-PCR结果为了分析AA是否能够抑制人OA软骨细胞的肥大化，我们首先用5μMAA处理人OA软骨细胞三天，然后使用qRT-PC....

图4.2.2未加药物处理(control)和AA处理人OA软骨细胞后(AA)两组COL-X、MMP-13和Runx2的免疫荧光染色结果

西南大学硕士学位论文164.2AA对人OA软骨细胞肥大化表型的影响4.2.1AA处理人OA软骨细胞后肥大化标记物COL-X、MMP-13和Runx2的qRT-PCR结果为了分析AA是否能够抑制人OA软骨细胞的肥大化，我们首先用5μMAA处理人OA软骨细胞三天，然后使用qRT-PC....

本文编号：3910773