异种（猪）脱细胞真皮基质激光微孔化并与rADSCs体外预培养促进体内构建真皮-脂肪复合物的实验及机制研究

发布时间：2024-05-07 02:46

　　目的:皮瓣移植是临床重要的修复重建技术,但是切取自体皮瓣对供瓣区损伤很大,利用组织工程技术构建皮瓣有望解决这一难题。真皮脂肪复合组织是皮瓣的主要组成部分,其构建是皮瓣构建首先要解决的难题。本研究尝试基于异种(猪)脱细胞真皮基质(PADM)在体内构建真皮脂肪复合组织。PADM结构致密,入体后宿主细胞难以进入,血管化缓慢,并会引发一定程度的炎症反应,给带来构建困难。本研究应用两种体外预处理方法共同对其进行优化:第一,激光微孔化(LMT)处理;第二,与自体脂肪间充质干细胞(rADSCs)预培养。本研究旨在探索激光微孔化前后的PADM是否能提供有利于脂肪干细胞发挥其作用的微环境,并验证体外优化处理是否能促进PADM入体后血管化,并降低炎症反应强度,从而构建出具有相当力学强度的真皮脂肪复合组织。方法:首先利用二氧化碳激光打孔机对PADM进行处理,使其产生孔径、孔距皆为1mm的微孔。然后将rADSCs以1×10⁵/孔的密度接种于PADM、激光微孔化PADM(LPADM)以及普通培养皿上,检测不同环境下培养的rADSCs其促血管形成及炎症调节相关基因表达及蛋白产物的差异。将PA...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

上海交通大学医学院硕士学位论文815ml离心管FALCONFranklinLakesNT美国96孔培养皿FALCONFranklinLakesNT美国24孔培养皿FALCONFranklinLakesNT美国6孔培养皿FALCONFranklinLakesNT美国细胞计数板上海市....

上海交通大学医学院硕士学位论文20从而促进其入体后的细胞渗透及血管形成。在激光微孔化处理的过程中，随着输出功率及同一位置重复次数的增加，能形成更深、更大的微孔，但同时材料的结构与强度也会随之逐渐减弱。最终我们选用的参数为：1mm孔径、1mm孔距、10W输出功率、每点重复4次，在最....

上海交通大学医学院硕士学位论文22够增加PADM的孔隙率及穿透性（图3E-H）。通过活/死细胞实验来研究细胞在材料上的生存能力。在Day1时各组细胞都表现出了100%的存活率，而Day3时，在MP组则有零星的死细胞出现，而在PADM及LPADM上则未发现明显的死细胞（图3K-P）....

上海交通大学医学院硕士学位论文24图4PADM及LPADM微环境对rADSCs旁分泌的影响。(A)rADSCs在不同培养条件下促血管形成因子及炎症调节因子的mRNA表达情况；(B–C)rADSCs不同培养条件下蛋白分泌情况；*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,....

本文编号：3966708