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探讨丙泊酚作用下组织蛋白酶K介导的血管新生机制

发布时间:2024-05-23 02:30
  目的:观察丙泊酚对人脐静脉内皮细胞的组织蛋白酶K(CathepsinK,CatK)和Notch1蛋白表达的影响,探讨丙泊酚对CatK和Notch1蛋白表达的意义。方法:选用人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常组(CON)和丙泊酚组(PF),当细胞长满80%左右时进行给药,以20μM丙泊酚浓度处理24h。收集上清采用ELISA法检测VEGF含量、收集部分细胞用Western Blot检测Cat K、c-Notch1和t-Notch1表达,若观察到CatK表达具有显著性变化,则进一步进行蛋白组学实验。采用TMT定量蛋白组学方法鉴定差异表达蛋白。应用Mascot软件对二级质谱图信息进行定性定量计算。对差异蛋白进行GO注释、亚基分类、GO富集分析、KEGG富集分析和结构域富集分析。结果:(1)丙泊酚介导人脐静脉内皮细胞中CatK表达增强和Notch1活化。(2)丙泊酚对人脐静脉内皮细胞的VEGF分泌无明显变化。(3)经过TmT定量蛋白组学实验,共筛选出115个差异表达蛋白,其中上调蛋白71个,下调蛋白44个。(4)差异表达蛋白GO分析结果,上调蛋白主要参与的生物过程,包括细胞、单生物及代...

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1?丙泊酌对CatK、c-Notchl和t-Notchl的表达??注.?与对照组相比,**表示P<0.01??

图1?丙泊酌对CatK、c-Notchl和t-Notchl的表达??注.?与对照组相比,**表示P<0.01??

3.?1两泊齡对Cat?K和Notchl表达的影响??丙泊酌促进人脐静脉细胞中CatK、c-Notchl的表达,对t-Notchl表达无明??显变化,见图1。??CON?PF?CON?PF??CatK?c-Notdil?祀?_??\?*??l-N—l?一一??lectin?mm?....


图3.差异表达蛋白数目??

图3.差异表达蛋白数目??

本研宄中鉴定到的蛋白质一共为6094个,其中含有定量信息的蛋白质为??5343个。按照1.3倍差异倍数,p<0.05为标准,共筛选出115个差异表达蛋白,??其中上调蛋白71个,下调蛋白44个,见图3。???()??■■■■??60??^?1?,??I?-??■,..:?:■■I....


图2.丙泊酚对VEGF分泌的影响??

图2.丙泊酚对VEGF分泌的影响??

3.?2丙泊酚对VEGF分泌的影响??丙泊酚组VEGF分泌量为1129±107pg/ml,对照组VEGF分泌量为??1181±96pg/ml,丙泊酚组与对照组相比,P>0.05,没有显著性差异,见图2。??11??


图4.上调蛋白GO分析结果??

图4.上调蛋白GO分析结果??

能为结合(HECTD1等42个)、催化活性(ABCF2等29个)、核酸结合转录??因子活性(UHRF1)、转录因子活性、蛋白结合(NACA)、转运(ABCF2),??图4和图5。??13??



本文编号:3980872

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