α-MSH在小鼠真菌性角膜炎中的抗炎作用及机制研究

发布时间：2023-04-17 01:25

　　目的:研究α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)在小鼠烟曲霉菌性角膜炎中的免疫调控作用及机制。方法:1.烟曲霉菌感染C57BL/6小鼠角膜,建立小鼠真菌性角膜炎动物模型,α-MSH联合烟曲霉菌感染组在感染后第1天开始给予球结膜下注射5ulα-MSH(1x10^-4mmol/m L)至感染后第3天,PBS联合烟曲霉菌感染组给予等量体积的PBS处理。裂隙灯下拍照观察小鼠角膜感染情况并记录小鼠角膜感染1天、3天后的临床评分。2.采用PCR法和Western blot法检测感染后第3天α-MSH干预组和PBS对照组小鼠角膜中炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6、MIP-2、iNOS和模式识别受体LOX-1和Dectin-1的m RNA和蛋白的表达;采用免疫荧光法特异性标记中性粒细胞和巨噬细胞,检测α-MSH干预组和PBS对照组感染后第3天角膜中中性粒细胞和巨噬细胞数量的变化。3.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度的外源性α-MSH(10nM,100n M,1000n M)处理RAW264.7小鼠巨...

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
材料与方法
    1.实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 实验试剂与耗材
        1.3 实验主要仪器与设备
    2.实验方法
        2.1 培养烟曲霉菌和制备烟曲霉菌菌丝刺激液
        2.2 C57BL/6小鼠烟曲霉菌性角膜炎模型的建立
        2.3 RAW264.7细胞培养
        2.4 α-MSH干预实验
        2.5 q RT-PCR
        2.6 Western blot
        2.7 免疫荧光染色
        2.8 CCK-8 检测α-MSH对小鼠RAW264.7 巨噬细胞增殖活性的影响
    3 统计学处理
结果
    1. Α-MSH减轻C57BL/6 小鼠烟曲霉菌性角膜炎临床评分
    2. Α-MSH减轻C57BL/6 小鼠烟曲霉菌性角膜炎的炎症反应
    3. Α-MSH减少C57BL/6 小鼠烟曲霉菌感染角膜中中性粒细胞和巨噬细胞的募集
    4. Α-MSH减少烟曲霉菌刺激的RAW264.7 小鼠巨噬细胞中炎症因子及模式识别受体的表达
    5. Α-MSH通过JNK/ERK信号通路抑制炎症因子的表达
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
附录
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3792281