circFIP1L1通过海绵吸附miR-1253靶向SFN调控EMT抑制鼻咽癌迁移和侵袭

发布时间：2023-04-21 04:17

　　目的:前期研究中发现,circFIP1L1-miR-1253-SFN信号轴在鼻咽癌(NPC)放疗中起着重要作用,本课题拟研究circFIP1L1-miR-1253-SFN信号轴通路在NPC转移及上皮间质转化(EMT)中的具体作用机制,为临床鼻咽癌转移治疗研究提供有效的靶点。方法:(1)收集鼻咽癌患者和正常人血清,qRT-PCR检测血清中circFIP1L1和miR-1253的表达水平;(2)qRT-PCR检测鼻咽部永生化上皮细胞NP69、NPC细胞株5-8F及6-10B中circFIP1L1、miR-1253、SFN的表达水平;(3)构建circFIP1L1、circFIP1L1 NC载体转染鼻咽癌细胞株5-8F及6-10B,qRT-PCR检测circFIP1L1、miR-1253、SFN表达水平;(4)NPC细胞株5-8F、6-10B瞬时转染miR-1253-mimic,miR-1253-inhibitor及其空载体组,经qRT-PCR检测circFIP1L1、SFN表达水平;(5)NPC细胞6-10B瞬时转染miR-1253-mimic,miR-1253-inhibitor,Wes...

【文章页数】：119 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略词索引
第1章 前言
    1.1 鼻咽癌病因及与治疗现状
    1.2 14-3-3σ蛋白与肿瘤
    1.3 miRNA与肿瘤
    1.4 circRNA与肿瘤
    1.5 上皮间质转化(EMT)与肿瘤
    1.6 前期工作基础
    1.7 研究内容
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 试剂
        2.1.3 实验仪器和设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 质粒载体的构建
        2.2.3 细胞瞬时转染
        2.2.4 qRT-PCR实验
        2.2.5 蛋白免疫印迹(Western blot)实验
        2.2.6 细胞划痕愈合实验
        2.2.7 Transwell迁移实验
        2.2.8 Transwell侵袭实验
        2.2.9 裸鼠成瘤实验
        2.2.10 统计分析实验结果
第3章 结果
    3.1 circFIP1L1/miR-1253/SFN的表达情况
        3.1.1 血清中circFIP1L1/miR-1253 的表达情况
        3.1.2 鼻咽部永生化上皮细胞(NP69)、鼻咽癌细胞5-8F、6-10B中circFIP1L1、miR-1253、SFN mRNA的表达情况
        3.1.3 circFIP1L1对miR-1253、SFN表达水平的影响
    3.2 .miR-1253与SFN的关系
        3.2.1 双荧光素酶实验验证miR-1253与SFN结合情况
        3.2.2 miR-1253对SFN表达水平的影响
        3.2.3 miR-1253与鼻咽癌EMT关系
    3.3 circFIP1L1和miR-1253对SFN表达
    3.4 circFIP1L和 miR-1253对14-3-3σ及鼻咽癌EMT的影响
    3.5 circFIP1L1、miR-1253 对鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响
        3.5.1 鼻咽癌细胞迁移侵袭与miR-1253的关系
        3.5.2 circFIP1L1 对鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响
        3.5.3 circFIP1L1和miR-1253 对鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响
    3.6 动物实验探究circFIP1L1 对鼻咽癌的影响
第4章 讨论
    4.1 circFIP1L1 与鼻咽癌
    4.2 miR-1253与肿瘤
    4.3 circFIP1L1与miR-1253及SFN的关系
    4.4 circFIP1L1/miR-1253/SFN对鼻咽癌EMT表达的调控作用
    4.5 circFIP1L1/miR-1253/SFN对鼻咽癌迁移侵袭的影响
    4.6 研究不足之处
第5章 结论
参考文献
综述
    References
本研究基金资助项目
攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：3795820