腺病毒介导p21WAF1/CIP1基因抑制PVR的研究

发布时间：2024-03-23 03:00

　　目的 通过建立兔增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)动物模型,探讨腺病毒介导p21WAF1/CIP1基因对PVR增生的抑制作用及机制,评价其治疗PVR的效果。 方法 1.PVR动物模型的建立：青紫蓝兔28只,随机分成两组,实验组及对照组各14只。实验组采用玻璃体腔注射人富含血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)联合巩膜外冷冻建立PVR模型,对照组采用玻璃体腔注射兔PRP建立PVR模型。行间接眼底镜、B型超声及HE染色检查,观察PVR程度及视网膜脱离的发生情况。 2.p21WAF1/CIP1在PVR发病机制中的作用：青紫蓝兔27只,随机分成两组,正常组3只,实验组24只。正常组不做任何处理；实验组每只兔随机选取一只眼作为实验眼,采用玻璃体腔注射人PRP联合巩膜外冷冻建立PVR模型。行蛋白免疫印迹(Western blot, WB)和逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR),检测PVR模型建立后第7d、14d、21...

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、PVR动物模型的建立
    1.1 对象和方法
        1.1.1 对象
        1.1.2 方法
    1.2 结果
        1.2.1 眼科检查结果
        1.2.2 眼科B超结果
        1.2.3 PVR分级
        1.2.4 组织病理学检查
    1.3 讨论
        1.3.1 PVR的基本病理过程和分期
        1.3.2 常见PVR动物模型的建立方法
        1.3.3 玻璃体腔注射人PRP联合巩膜外冷冻建立兔PVR模型
    1.4 小结
二、p21^WAF1/CIP1在PVR发病中作用机制的研究
    2.1 对象和方法
        2.1.1 对象
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 WB方法检测视网膜p21^WAF1/CIP1、CDK2、cyclin E蛋白表达
        2.2.2 RT-PCR法检测视网膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表达
    2.3 讨论
        2.3.1 细胞因子在PVR发病中的作用
        2.3.2 细胞周期及其调控机制
        2.3.3 p21^WAF1/CIP1的生物学功能
        2.3.4 p21^WAF1/CIP1在PVR发病机制中的作用
    2.4 小结
三、腺病毒介导外源性p21^WAF1/CIP1基因抑制体外培养hRPE细胞增殖及迁移
    3.1 对象和方法
        3.1.1 对象
        3.1.2 方法
    3.2 结果
        3.2.1 p21^WAF1/CIP1基因转染人视网膜色素上皮细胞形态及数目的影响
        3.2.2 MTT法检测细胞增殖
        3.2.3 Transwell检测细胞迁移
        3.2.4 流式细胞仪检测细胞周期
        3.2.5 WB法检测p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E蛋白的表达
        3.2.6 RT-PCR方法检测p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表达
    3.3 讨论
        3.3.1 RPE细胞在PVR发病中的作用研究
        3.3.2 p21^WAF1/CIP1基因对hRPE细胞增殖及迁移能力的影响
        3.3.3 腺病毒转染p21^WAF1/CIP1基因对hRPE细胞周期调控的机制
    3.4 小结
四、腺病毒介导p21^WAF1/CIP1基因抑制兔PVR的实验研究
    4.1 对象和方法
        4.1.1 对象
        4.1.2 方法
    4.2 结果
        4.2.1 临床观察结果及PVR分级
        4.2.2 标本大体观察及病理结果
        4.2.3 WB及RT-PCR检测视网膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E表达
    4.3 讨论
        4.3.1 腺病毒介导堆因转染技术在眼部疾病中的应用
        4.3.2 增生性玻璃体视网膜病变的治疗现状
        4.3.3 腺病毒介导p21^WAF1/CIP1基因对PVR的抑制作用
    4.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3935351