探针药物法评价艾瑞昔布对CYP450酶活性的影响

发布时间：2017-05-12 05:00

  本文关键词：探针药物法评价艾瑞昔布对CYP450酶活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分探针药物法评价艾瑞昔布对CYP3A酶的影响目的：建立CYP3A探针药物咪达唑仑的HPLC测定方法,通过比较合用艾瑞昔布前后大鼠体内眯达唑仑药动学参数的变化,进而探讨艾瑞昔布对CYP3A酶是否有诱导或者抑制作用。方法：色谱条件：Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(56：44,V/V)；检测波长：225 nm；流速：1.0mL·min-1;柱温：30℃；内标：地西泮。将大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只,实验组每次灌胃艾瑞昔布灌胃液20 mg·kg-1,2次／天,对照组每天灌胃等量纯化水,连续7天。第8天,每只大鼠尾静脉注射眯达唑仑10mg·kg-1,于给药后不同时间点眼内眦取血,样品离心后取上层血浆样品200μL于5 mL离心管中,加入内标溶液20μL,加入乙腈1 mL沉淀蛋白,涡旋振荡3 min,离心(6525×g)2 min,取上清液950μL于1.5 mL离心管中,40℃水浴下氮气流吹干,残渣用100μL流动相复溶,20μL进样分析。血浆药物浓度采用DAS 2.1.1软件拟合药动学参数,使用SPSS 13.1软件对两组的药动学参数进行统计学分析。结果：实验组与对照组的AUCo-t分别为(3.42±0.91)mg·h·L-1和(3.83±0.84)mg·h·L-1;AUC0-∞分别为(3.34±0.88)mg·h·L-1和(3.77±0.86) mg·h·L-1;t1/2分别为(0.37±0.07)h和(0.35±0.08)h;Cmax分别为(11.85±4.45)mg·L-1和(12.36±3.48)mg·L-1;V分别为(1.62±0.45)L·kg-1和(1.37+0.39)L·kg-1;CL分别为(3.14±0.85)L·h-1·kg-1和(2.74±0.66)L·h-1·kg-1。实验组与对照组主要药动学参数的差异均无统计学意义(P0.05)。结论：本研究建立了大鼠血浆中咪达唑仑HPLC测定方法,药动学实验结果显示,合用艾瑞昔布前后咪达唑仑药动学参数无显著性变化,艾瑞昔布对大鼠静脉注射咪达唑仑的药动学无影响,说明艾瑞昔布不影响CYP3A酶活性。第二部分探针药物法评价艾瑞昔布对CYP2C9酶的影响目的：建立CYP2C9探针药物甲苯磺丁脲的HPLC测定方法,利用探针药物法研究艾瑞昔布对大鼠体内CYP2C9酶的影响。方法：色谱条件：DiamonsilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸-三三乙胺(50:50:0.4:0.5,V/V/V/V);检测波长：230 nm；流速：1.0 mL·min-1;柱温：30℃；内标：卡马西平。将大鼠随机分为实验组和对照组,每组18只。实验组每天灌胃艾瑞昔布灌胃液20mg·kg-1,2次/天；对照组每次灌胃等量纯化水,连续7天。第8天,每只大鼠灌胃甲苯磺丁脲灌胃液50mg·kg4,分别于给药后不同时间内眼内眦取血0.5 mL于肝素钠抗凝的离心管中,离心(6525×g)2 min,取上层血浆200μL于5 mL离心管中,加入内标溶液20μL,加入提取剂二氯甲烷1 mL,涡旋振荡3 min,离心(6525×g)2 min,取下层有机相950μL于1.5 mL离心管中,40℃水浴下氮气流吹干,残渣用100μL流动相复溶,取20μL进样分析,测定浓度。血浆药物浓度采用DAS 2.1.1软件拟合药动学参数,使用SPSS 13.1软件对两组的药动学参数进行统计学分析。结果：实验组的AUCo-t分别为(766.25±45.49) mg·h·mL-1和(1015.51±194.80) mg·h·mL-1;AUC0-∞分别为(811.96±172.82) mg·h·mL-1和(1077.64±254.16)mg·h·mL-1; Tmax分别为(0.99±0.68)h和(1.38±0.62)h；V分别为(0.54±0.11)L·kg-1和(0.25±0.09)L·kg-1;CL分别为(0.06±0.01)L·h-1·kg-1和(0.05±0.01)L·h-1·kg-1。实验组的AUCo-t、AUC0-∞、Tmax、V和CL与对照组相比均有显著性差异(P0.05)。结论：本研究建立了大鼠血浆中的甲苯磺丁脲HPLC测定方法,药动学实验结果显示合用艾瑞昔布后,甲苯磺丁脲的AUC0-t和AUCo-显著降低,CL明显增加。说明艾瑞昔布诱导CYP2C9酶的活性,使甲苯磺丁脲的代谢加快。第三部分探针药物法评价艾瑞昔布对CYP2D6酶的影响目的：建立CYP2D6探针药物氢溴酸右美沙芬的LC-MS/MS方法,通过合用艾瑞昔布前后探针药物药动学参数的变化来探讨艾瑞昔布对CYP2D6酶的影响。方法：色谱及质谱条件：Symmetry C18色谱柱(2.1 mm×100mm,3.5 μm)；流动相：A为1‰甲酸水溶液,B为乙腈。采用梯度洗脱：0-3 min: 60%→90%B; 3～3.5 min:90%→60%B; 3.5～5 min:60%B;流速：0.4mL·min-1;进样量：10μL；柱温：40℃。离子化方式：电喷雾离子化源(ESI)；监测方式：正离子监测；扫描方式：多反应监测(MRM)；离子源喷射电压5500 V；离子源温度：550℃；气帘气(CUR)压力：10 psi；源内气体1 (GS1, N2)压力：55 psi；源内气体2 (GS2, N2)压力：55 psi；碰撞气(CAD)压力：4 psi；氢溴酸右美沙芬的DP、CE值分别为95和37,磺胺甲嗯唑的DP、CE值分别为73和22；用于定量分析的离子反应分别为m/z 272.3→212.8(氢溴酸右美沙芬)和m/z 254.2→155.8(磺胺甲嗯唑,内标)。30只大鼠分为实验组和对照组,每组15只,实验组每天灌胃艾瑞昔布20mg·kg-1,2次/天,对照组每天灌胃等量纯化水,连续7天。第8天,每只大鼠灌胃氢溴酸右美沙芬12mg·kg-1,于给药后不同时间点眼内眦取血,于肝素钠抗凝离心管中。离心后取上层血浆样品200μL于5 mL离心管中,加入内标溶液20μL,加入乙酸乙酯1 mL,涡旋振荡3 min,离心2 min(离心力6525×g),取上清液950μL于1.5 mL离心管中,40℃水浴下氮气流吹干,残渣用300μL流动相复溶,10μL进样,记录峰面积。DAS 2.1.1软件拟合药动学参数,使用SPSS 13.1软件对两组的药动学参数进行统计学分析。结果：实验组与对照组药动学参数：t1/2分别为(7.23+2.16)h和(5.48+2.93)h；实验组与对照组的t1/2有显著性差异(P0.05)。结论：本实验建立了大鼠血浆中氢溴酸右美沙芬的LC-MS/MS含量测定方法。药动学实验结果表明,合用艾瑞昔布前后氢溴酸右美沙芬在大鼠体内的半衰期明显延长,说明艾瑞昔布对CYP2D6酶有轻微抑制作用,减慢右美沙芬的代谢。
【关键词】：艾瑞昔布 探针药物 药动学 HPLC LC-MS/MS CYP3A CYP2C9 CYP2D6
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-14
• 英文缩写14-15
• 引言15-17
• 第一部分 探针药物法评价艾瑞昔布对CYP3A酶的影响17-44
• 前言17
• 材料与方法17-21
• 结果21-23
• 附图23-34
• 附表34-42
• 讨论42
• 小结42-43
• 参考文献43-44
• 第二部分 探针药物法评价艾瑞昔布对CYP2C9酶的影响44-70
• 前言44
• 材料与方法44-48
• 结果48-50
• 附图50-59
• 附表59-67
• 讨论67
• 小结67-69
• 参考文献69-70
• 第三部分 探针药物法评价艾瑞昔布对CYP2D6酶的影响70-96
• 前言70
• 材料与方法70-75
• 结果75-77
• 附图77-86
• 附表86-94
• 讨论94
• 小结94-95
• 参考文献95-96
• 结论96-97
• 综述 昔布类非甾体抗炎药药动学及药效学概述97-103
• 参考文献101-103
• 致谢103-104
• 个人简历104-105

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张香凝;李想;刘高峰;;RP-HPLC法同时测定大鼠血浆中4种CYP450探针药物的浓度[J];药物分析杂志;2012年11期

  本文关键词：探针药物法评价艾瑞昔布对CYP450酶活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：358778