壳寡糖的酶法制备及其抗肥胖活性研究

发布时间：2024-01-24 15:07

　　目的肥胖是由机体能量代谢失衡引起的全球性健康问题,极大地降低了人类的生活质量和寿命。壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)是由壳聚糖水解而来的低聚寡糖,具有水溶性较好、更好的生物相容性、无毒副作用的特征,在减肥领域有着广阔的应用前景。壳聚糖酶水解法是环保而高效的获得COS的方法。然而,目前COS多由非壳聚糖酶法水解壳聚糖而来,而且目前报道的壳聚糖酶大多数稳定性和热恢复性不好,这些极大地限制了其应用。因此,寻找新的具有优良特性的壳聚糖酶并用于制备具有抗肥胖活性的COS至关重要。方法从黄海沉积物中筛选出产壳聚糖酶的海洋细菌,扩增其16S rDNA进行序列比对。在含壳聚糖的培养基中培养该菌,对产生的壳聚糖酶进行纯化,得到壳聚糖酶并对其酶学性质进行表征。研究该酶水解制备COS的最适条件,在5升发酵罐中建立了COS的制备工艺,分析COS的组成。用COS喂养高脂饮食诱导的肥胖KM小鼠,收集小鼠血清进行脂质分析,留取小鼠的肝脏和附睾脂肪进行组织切片的分析,研究COS的抗肥胖活性。结果序列的比对显示所得菌株与假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)的序列相似性...

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一部分 壳聚糖酶的分离纯化和性质研究
    材料与方法
        1 仪器与试剂
        2 试剂、培养基的配制
        3 产壳聚糖酶菌株的筛选及鉴定
        4 壳聚糖酶活性的测定
        5 壳聚糖酶的表达、纯化
        6 壳聚糖酶浓度的测定
        7 壳聚糖酶的性质鉴定
    结果
        1 产壳聚糖酶菌株的筛选及鉴定
        2 壳聚糖酶活性测定
        3 酶的分离纯化结果
        4 酶浓度测定结果
        5 壳聚糖酶的性质鉴定
    讨论
第二部分 壳寡糖的制备及鉴定
    材料与方法
        1 仪器与试剂
        2 壳聚糖水解的条件优化
        3 COS的酶法制备
        4 COS的含量测定
        5 COS的薄层色谱(TLC)和电喷雾质谱(ESI-MS)分析
    结果
        1 壳聚糖水解的条件优化
        2 COS的含量测定
        3 COS的 TLC和 ESI-MS检测
    讨论
第三部分 壳寡糖的抗肥胖活性
    材料与方法
        1 仪器与试剂
        2 实验动物及分组
        3 血清脂质分析
        4 组织学分析
        5 数据分析
    结果
        1 COS降低小鼠的体重
        2 COS降低小鼠血清TC和TG
        3 COS具有肝脏保护作用
        4 COS降低附睾脂肪组织的重量
    讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3884025