在制备尖吻蝮蛇毒出血毒素抗血清中不同凝胶染色方法的比较

发布时间：2017-07-25 19:08

  本文关键词：在制备尖吻蝮蛇毒出血毒素抗血清中不同凝胶染色方法的比较

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【摘要】：目的:寻找在制备出血毒素抗血清中电泳后染色凝胶的好方法。方法:按照前人的方法从皖南产尖吻蝮蛇毒中初步分离3种出血毒素:Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ并获得3种粗提取的出血毒素,用制备电泳的方法进一步纯化Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ,对每种出血毒素,配制6块制备电泳板并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用6种不同的染色方法分别染色,将含出血毒素的凝胶切下,磨细后直接免疫注射小鼠并获得抗血清,用ELISA检测和中和出血毒素出血活性两种方法检测抗血清的质量。结果:不同染色方法制备的抗血清中有效Ig G浓度不同,用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色制备的抗血清有效Ig G浓度最高。结论:用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色是制备抗血清最好的染色方法。
【作者单位】： 皖西学院生物与制药工程学院;
【关键词】： 尖吻蝮蛇 出血毒素 抗血清制备 染色法 质量检测
【基金】：安徽自然科学基金项目(1408085MC43) 安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2015A454,KJ2013A264)
【分类号】：R991
【正文快照】： 1本文为安徽自然科学基金项目(1408085MC43)和安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2015A454,KJ2013A264)。尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)俗称五步蛇,属于蝮亚科、蝮属,分布于我国长江以南地区(包括台湾),是我国特有的剧毒蛇。该蛇毒为血循环型蛇毒,其主要毒素为出血毒素。Xu等[1]

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4 韦传宝;徐询;王玉珍;覃公平;胡征林;邓禄延;;五步蛇毒毒中蛋白凝集素的发现及其凝集特性的研究[J];蛇志;1989年04期

5 叶文娟,冉永禄,赖仞,龚光林,俞帆,曾昭权;尖吻蝮蛇毒出血毒素DaHT-3的红外光谱测定[J];蛇志;1999年02期

6 陈真龙,丁兰,余华明,赵大庆,王守业,刘清亮;皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodonacutus)蛇毒出血毒素Ⅲ(AaHⅢ)的荧光淬灭研究[J];淮海工学院学报(自然科学版);1998年03期

7 陈真龙，张利民，，丁兰，余华明,赵大庆，王守业，刘清亮;皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒出血毒素Ⅲ(AaHⅢ)的荧光淬灭研究[J];化学物理学报;1998年05期

8 ;[J];;年期

本文编号：572803