TCDD/MEHP共暴露对MCF10A细胞影响的初步探讨

发布时间：2023-10-04 04:17

　　目的:本研究旨在探讨环境中广泛存在的内分泌干扰物2,3,7,8-四氯二苯并-对-二噁英(TCDD)和邻苯二甲酸单(2-乙基己)酯(MEHP)单独以及共暴露对正常人乳腺细胞MCF10A的影响,重点关注TCDD和MEHP对MCF10A在AhR信号通路的相关基因和蛋白表达的影响,以初步探索TCDD和MEHP共暴露对人乳腺细胞MCF10A的毒性作用机制。方法:1.采用MTS方法检测TCDD/MEHP对正常人乳腺上皮细胞MCF10A染毒处理的细胞活性影响。用MTS实验检测1p M、10p M、100p M、1n M、10n M的TCDD染毒处理正常人乳腺上皮细胞MCF10A 24h和48h后细胞活性的影响;或1μM、5μM、10μM、50μM、100μM的MEHP对正常人乳腺上皮细胞MCF10A染毒处理24h和48h后细胞活性的影响;以及1p M、10p M、100p M、1n M的TCDD和100μM的MEHP对正常人乳腺上皮细胞MCF10A共暴露染毒处理24h和48h后细胞活性的影响。2.采用划痕实验的方法检测TCDD/MEHP对正常人乳腺上皮细胞MCF10A迁移能力的影响。3.采用RT-P...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞系
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要仪器设备
        1.1.4 主要耗材
    1.2 方法
        1.2.1 正常人乳腺上皮细胞MCF-10A的培养和处理
        1.2.2 染毒物质的配制
        1.2.3 MTS实验检测细胞活性
        1.2.4 细胞划痕实验
        1.2.5 siRNA转染
        1.2.6 PCR相关基因mRNA的表达水平
        1.2.7 WesternBlot检测目的蛋白表达水平
    1.3 统计分析
结果
    2.1 TCDD/MEHP对MCF10A细胞增殖的影响
        2.1.1 MEHP单独暴露对正常人乳腺上皮细胞MCF10A的细胞活性影响
        2.1.2 TCDD单独暴露对正常人乳腺上皮细胞MCF10A的细胞活性影响
        2.1.3 MEHP/TCDD共暴露对正常人乳腺上皮细胞MCF10A的细胞活性影响
    2.2 TCDD/MEHP对MCF10A迁移转化的影响
        2.2.1 TCDD/MEHP对MCF10A迁移能力的影响
        2.2.2 TCDD/MEHP对MCF10A迁移相关mRNA以及AhR信号通路相关基因表达水平的影响
    2.3 TCDD/MEHP通过AhR信号通路对MCF10A影响
        2.3.1 测定siRNA干扰AhR干扰效率
        2.3.2 MEHP与TCDD共暴露对AhR信号通路相关基因表达水平的影响
        2.3.3 TCDD/MEHP对MCF10A通过AhR信号通路的相关蛋白表达水平的影响
讨论
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3851298