自噬在TDI诱导的气道上皮细胞炎症反应中的作用研究

发布时间：2024-02-15 07:20

　　【研究目的】探讨自噬在甲苯二异氰酸酯诱导人气道上皮细胞炎性反应及气道重塑中的作用,为TDI哮喘的发病机制研究提供新思路,为进一步对职业性哮喘进行预防和治疗提供方向。【研究方法】通过合成TDI-人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)偶联物并用Gutmann法检测TDI-HSA偶联物中TDI的浓度,BCA法检测TDI-HSA偶联物中HSA含量。应用不同浓度的TDI-HSA及HSA刺激人支气管上皮细胞(16HBE),通过细胞生存率实验(CCK-8)确定最高染毒浓度,利用流式细胞仪、ELISA实验检测不同浓度下16HBE细胞ROS表达水平及炎性反应水平;利用透射电镜、Western blot实验检测16HBE细胞暴露于不同浓度TDI-HSA后自噬活化情况。确定最佳染毒浓度后,探讨自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)及自噬激动剂rapamycin(Rapa)对16HBE细胞炎性反应和气道重塑的影响。实验分为五组:溶剂对照组、TDI-HSA组、Rapa组、TDI-HSA+Rapa组和TDI-HSA+3-MA组。CCK-8法检测各组细胞存活率;利用透射电镜、W...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1不同浓度TDI-HSA，HSA对16HBE细胞存活率的影响

/mL及以下时，不同剂量的TDI-HSA组或HSA组的细胞剂量TDI-HSA组和HSA组的细胞存活率分别比较，差异；提示TDI-HSA组和HSA组在剂量为120μg/mL以下不研究确定以120μg/mL作为TDI-HSA和HSA的最高处理....

图2不同浓度TDI-HSA、HSA对16HBE细胞FITC表达的影响

济南大学硕士学位论文1.3.3TDI-HSA和HSA对16HBE细胞ROS表达的影响16HBE细胞ROS表达水平在处理组间、染毒剂量的主效应上、处理组间与染毒剂量的交互作用上均有统计学意义（F值分别为530.74、117.21、119.50，P＜0.01....

图3不同浓度TDI-HSA、HSA对细胞IL-4，IL-6表达的影响

图3不同浓度TDI-HSA、HSA对细胞IL-4，IL-6表达的影响注：与对照组相比，#P<0.05。表2各组16HBE细胞内ROS和细胞上清液中IL-4、IL-6水平的比较（x±s）样品数（个）ROSIL-4（ng/L）IL-6（ng/L）T....

图4透射电子显微镜下不同剂量TDI-HSA处理16HBE细胞后自噬表达情况（×12000）

电子显微镜下不同剂量TDI-HSA处理16HBE细胞后自噬表达情况（B：40μg/mLTDI-HSA组；C：80μg/mLTDI-HSA组；D：120μg/mLTDI-HSA组自噬溶酶体。HSA处理细胞后自噬相关蛋白的表达比较，40、80、120μg/mLTD....

本文编号：3899442