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低剂量氯化镉诱导L929细胞增殖hormesis效应的研究

发布时间:2024-03-21 20:20
  研究目的: 观察氯化镉是否诱导小鼠成纤维(L929)细胞增殖的毒物兴奋(hormesis)效应;确定氯化镉诱导L929细胞增殖毒物兴奋剂量范围(hormetic zone);探讨氯化镉诱导细胞增殖的hormesis效应的机制和安全性。 研究方法与研究内容: 1噻唑蓝(MTT)比色法观察不同剂量氯化镉对体外培养24h的L929细胞增殖的影响,确定细胞增殖毒物兴奋效应的hormetic zone。 2黄嘌呤氧化酶法检测不同剂量氯化镉染毒12h、24h诱导L929细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性变化。 3荧光定量PCR方法检测不同剂量氯化镉24h诱导L929细胞中STAT3基因、P53基因、REVL3基因、BCL-2基因表达的变化。 研究结果: 1MTT试验中发现氯化镉染毒L929细胞24h后,2μmol/L以下剂量组的细胞相对增殖率与空白组的细胞相对增殖率基相同,差异没有显著性(p<0.05)。 2μmol/L~15μmol/L剂量组细胞相对增殖率较空白对照组高(p<0.05),表现出细胞增殖的毒物兴奋效应。剂量高于20μmol/L时,L929细胞的相对增殖率较空白对照组的相...

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1毒物兴奋效应β型曲线和U型曲线

图1毒物兴奋效应β型曲线和U型曲线

作用剂量或未观察到不良效应水平(NOAEL)而言,通常低于NOAEL就作为低浓度水平。在剂量‐反应关系曲线上表现为双相剂量反应关系特征。即β型曲线和U型曲线(图1)。β型曲线主要表现了外源性化学物在低剂量时对机体正常生命指标的促进效应优于对照组(存活率);而U型....


图2线性阈值模型(A)和非线性阈值模型(B)

图2线性阈值模型(A)和非线性阈值模型(B)

应其机理应是亚细胞水平的,最有可能的方式是通过对生物合成速率进表现出在生物化学水平改变上以及Hormesis现象的整个过程中。Cala为毒物兴奋效应显示了一种过度补偿效应,观点认为生物体受到刺激,制反应之后会出现一个补偿过程,最终超过控制行为,从而导致一个净,也就是通常所提及....


图3QPCR原理图

图3QPCR原理图

图3QPCR原理图骤A提取同剂量氯化镉培养基染毒L929细胞24h,弃去培养液,2mlPBS溶胞两遍。六孔板中每孔加入1ml裂解液,用枪头吹打L929细胞至淀,收集裂解液于离心管中。0.2ml氯仿,盖紧离心管,用手剧烈振荡15秒,待溶液充分乳化静置....


图8STAT3基因扩增曲线

图8STAT3基因扩增曲线

5μmol/L剂量下基因表达量最大,三个剂量组间基因表达量差异没有统计学义,表明在此剂量范围内的氯化镉浓度刺激L929细胞引起了STAT3基因的表上调。10μmol/L~20μmol/L浓度下基因表达较空白组无统计学差异,基因表量小于0.01μmol/L~5μmol....



本文编号:3934088

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