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DNA/RNA同步提取方法学的建立及其法医学应用研究

发布时间:2024-03-08 06:07
  目的 为了更好的确定微量生物检材的个体来源和组织来源,本课题旨在建立一种用Trizol试剂对法庭科学中同一生物检材同步提取DNA/RNA的新方法;用建立的方法对五种法医相关体液DNA进行检测,以进一步验证所建立方法的有效性;并探索建立这五种体液的特异性mRNA复合扩增体系。 方法 制备同一个体的外周血FTA卡样本20份,每份含10μL外周血。分为两组:普通Trizol法组,按照Trizol试剂说明书对样本DNA进行提取;改良Trizol法组,通过改变普通Trizol法收集水相总RNA后余下的中间层和有机相的pH,用乙醇沉淀当中的DNA,然后用Promega DNA IQTM试剂盒纯化。检测两种方法提取DNA的纯度和浓度,并以之为模板进行终点PCR和STR检测,比较两种方法提取DNA的纯度、浓度及STR分型;两种方法总RNA的提取均按照试剂说明书进行,使用本课题组成员前期所建立的方法检测RNA的提取效果;利用所建立的改良Trizol法对外周血、唾液、精液、阴道分泌物、月经血DNA/RNA进行提取,检测提取DNA的STR分型;选取扩增条件相同的9对引物,包括7对以上五种体液的特异性mRNA...

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
目录
摘要
Abstract
前言
第一部分 改良Trizol法同步提取外周血DNA/RNA方法学的建立
    1 材料
    2 方法
    3 结果
    4 讨论
    5 小结
第二部分 改良Trizol法的法医学应用研究
    1 材料
    2 方法
    3 结果
    4 讨论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢
个人简介



本文编号:3922122

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