紫杉醇细胞内药代动力学及紫杉醇类药物质谱裂解规律研究

发布时间：2016-10-26 18:55

  本文关键词：紫杉醇细胞内药代动力学及紫杉醇类药物质谱裂解规律研究，由笔耕文化传播整理发布。

《吉林大学》 2013年

紫杉醇细胞内药代动力学及紫杉醇类药物质谱裂解规律研究

马文晓  

【摘要】：本文采用液相色谱-串联质谱技术，研究了细胞内紫杉醇药代动力学特性及两种紫杉醇类药物电喷雾离子阱质谱裂解规律，为该类药物剂型评价和体内外定性、定量分析提供参考。 建立并确证了一种超灵敏的高效液相色谱-质谱方法，并用于测定细胞隔室内紫杉醇药物浓度，选择多烯紫杉醇作为内标。A549肺癌细胞（106）用紫杉醇（2ng/mL）孵育不同时间，然后用试剂盒提取细胞质、细胞膜/细胞器、细胞核和细胞骨架中可溶性蛋白。经超声除去与紫杉醇结合的蛋白，然后用液-液萃取方法进行提取，提取试剂为乙醚：二氯甲烷（2:1, v/v)。选用Ascentis Express C18色谱柱（50mm×4.6mm,2.7μm)，流动相为乙腈：0.1%甲酸水溶液（50:50, v/v)。采用电喷雾正离子模式，多重反应监测离子反应为m/z854.4→286.3（紫杉醇）、m/z808.6→226.1（多烯紫杉醇）。方法的线性范围2–600pg/mL，日内和日间精密度小于7%、准确度在±12%以内。提取回收率大约为70%，基质效应96%。亚细胞部分结果表明：紫杉醇的分布与孵育时间有关，，孵育0.5h，紫杉醇主要分布在细胞质、细胞核和细胞膜中，孵育时间大于2.5h，紫杉醇主要分布在A549细胞隔室的细胞骨架部分。 采用高质量准确度、高分辨率的Triple TOF研究了在电喷雾正离子模式下含有紫杉烷二萜基本骨架的两种紫杉醇类药物的质谱裂解行为。通过ESI-MS产生的[M+H]~+准分子离子获得相应化合物的相对分子质量信息，对[M+H]~+进行碰撞诱导解离（CID)，对碎片离子进行准确质量测定，确认这些碎片离子的元素组成，获得相应化合物的裂解途径信息。 本文建立的紫杉醇分析方法快速、灵敏，适用于低浓度紫杉醇生物样品的测定。质谱分析结果表明结构类似的紫杉醇和多烯紫杉醇具有相似的电喷雾质谱行为，获得的结构信息可以为紫杉醇类物质的定性鉴别和定量分析提供依据。

【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R969.1;O657.72
【目录】：

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1 再帕尔·阿不力孜,方起程,梁晓天,高山光男;利用-质谱质谱方法探讨紫杉烷类二萜化合物的裂解特征[J];科学通报;1999年07期

2 张洁;段继诚;梁振;张维冰;张丽华;霍玉书;张玉奎;;东北红豆杉及其伤愈组织粗提物中紫杉醇的HPLC-ESI-MS/MS分析研究[J];药学学报;2006年09期

3 崔萍;霍长虹;李力更;张嫚丽;史清文;;作用于微管的天然产物[J];中草药;2010年01期

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2 王巍杰;杨永强;吴尚卓;;细胞悬浮培养制备紫杉醇的研究进展[J];河北理工大学学报(自然科学版);2011年01期

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6 钱隽;基于液相色谱—质谱联用技术的紫杉醇分析方法及其临床应用的研究[D];复旦大学;2012年

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10 王广基;;中药药代动力学研究关键技术与新思路[A];全国药物治疗学学术研讨会报告汇编[C];2006年

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2 河北远征药业股份有限公司 魏占勇;[N];中国畜牧报;2004年

3 于海源;[N];中国医药报;2003年

4 ;[N];中国医药报;2003年

5 复旦大学医学院华山医院抗生素研究所 郁继诚 张菁;[N];医药经济报;2001年

6 王竹生;[N];健康报;2002年

7 柯晨;[N];科技日报;2003年

8 ;[N];中国医药报;2003年

9 ;[N];中国医药报;2003年

10 康震;[N];中国医药报;2010年

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